Question

16．回答有關微生物培養(yǎng)方面的問題：

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO4•7H2O	0.2g
葡萄糖	10.0g
尿素	1.0g
瓊脂	15.0g
自來水	定容至1000 mL

（1）該培養(yǎng)基配方含有微生物所需要的4類營養(yǎng)物質．其中最主要的碳源是葡萄糖，氮源是尿素．
（2）該培養(yǎng)基按物理性質劃分是固體培養(yǎng)基；按培養(yǎng)基的作用劃分是選擇培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基具有該作用的原因是∥、該培養(yǎng)基中唯一的氮源是尿素，只有能分解尿素的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長和繁殖．
（3）在該培養(yǎng)基中，可通過檢測pH的變化來判斷尿素是否被分解，依據的原理是在細菌分解尿素的過程中，細菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的pH升高．
（4）若用該培養(yǎng)基來鑒定某種細菌是否能夠分解尿素，可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，尿素被分解后指示劑變紅色．
（5）某同學嘗試使用罐頭瓶在常溫下制作果酒，開始時向消過毒的罐頭瓶中加入了新鮮的葡萄汁和酵母菌，添加酵母菌的原因是酵母菌能分解葡萄糖形成酒精（或酵母菌進行無氧呼吸產生酒精），添加葡萄汁的目的是為酵母菌的生長發(fā)育提供所需的各種營養(yǎng)物質（或碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子）．
（6）若葡萄汁中含有醋酸菌，在葡萄酒發(fā)酵旺盛時，醋酸菌能否將酒精轉變成醋酸？不能，原因是醋酸菌是好氧菌，葡萄酒發(fā)酵階段的無氧條件抑制了醋酸菌的生長、采用平板劃線法接種，開始接種時要灼燒接種環(huán)，目的是滅菌．
（7）檢驗飲用水大腸桿菌的含量時通常將水樣進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱為D．在下面所示的四種菌落分布圖中，不可能是用該方法得到的是：稀釋涂布平板法．

用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時是否需要設置對照組？需要．為什么？因為需要判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染（培養(yǎng)基滅菌是否合格）．

Answer 1

分析 本題是對用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基的配方及營養(yǎng)成分、選擇培養(yǎng)基的選擇作用、常用的接種方法、無菌操作技術、對分解尿素的菌的鑒定等相關知識的綜合性考查，回憶微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基的配方和營養(yǎng)成分、選擇培養(yǎng)基的選擇作、常用的接種方法的具體操作和目的，無菌操作技術、對分解尿素的菌的鑒然后結合問題進行解答．

解答 解：（1）分析表格中培養(yǎng)基配方可知，該培養(yǎng)基中含有碳源、氮源、水、無機鹽4類微生物生長所需要的營養(yǎng)物質．
（2）該培養(yǎng)基配方中含有瓊脂，所以按按物理性質劃分是固體培養(yǎng)基．由于該培養(yǎng)基中尿素作為唯一氮源，只有分解尿素的微生物才能生長繁殖，不能利用尿素的微生物因缺乏氮源而無法生長繁殖，所以按功能劃分，該培養(yǎng)基又是選擇培養(yǎng)基．
（3）由于細菌分解在尿素的過程中合成脲酶，脲酶將尿素分解成氨，會使培養(yǎng)基堿性增強，PH升高，所以可以用檢測pH的變化的方法來判斷尿素是否被分解．
（4）若用該培養(yǎng)基來鑒定某種細菌是否能夠分解尿素，可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，尿素被分解后產生氨，PH升高，指示劑變紅．
（5）某同學嘗試使用罐頭瓶在常溫（21±3℃）下制作果酒，開始時向消過毒的罐頭瓶加入了新鮮的葡萄汁和酵母菌，添加酵母菌的目的是酵母菌無氧呼吸產生酒精，添加葡萄汁的目的是為酵母菌的生長發(fā)育提供所需要的各種營養(yǎng)物質．
（6）若葡萄汁中含有醋酸菌，由于在葡萄酒發(fā)酵旺盛時是無氧條件，而醋酸菌是好氧菌，葡萄酒發(fā)酵階段的無氧條件抑制了醋酸菌的生長，所以醋酸菌不能將酒精轉變成醋酸．
（7）純化大腸桿菌的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法．題干中所說的方法是稀釋涂布平板法，如圖中的CAB就是逐步稀釋獲得的，而培養(yǎng)皿D是通過平板劃線法獲得的．稀釋涂布平板法接種統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時需要進行對照實驗，原因是需要判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染（培養(yǎng)基滅菌是否合格）．
故答案為：
（1）4  
（2）固體  選擇    該培養(yǎng)基中唯一的氮源是尿素，只有能分解尿素的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長和繁殖
（3）在細菌分解尿素的過程中，細菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的pH升高      
（4）酚紅  紅
（5）酵母菌能分解葡萄糖形成酒精（或酵母菌進行無氧呼吸產生酒精）　所需的各種營養(yǎng)物質（或碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子）
（6）不能  醋酸菌是好氧菌，葡萄酒發(fā)酵階段的無氧條件抑制了醋酸菌的生長      滅菌
（7）稀釋涂布平板法  D  需要  因為需要判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染（培養(yǎng)基滅菌是否合格）

點評 本題的知識點是培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分，選擇培養(yǎng)基的選擇作用，檢測分解尿素的菌的方法，果酒制作的原理，主要考查學生對基礎知識的掌握和運用．