Question

【題目】如圖甲、乙中的箭頭表示三種限制酶的酶切位點(diǎn)，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，neoR表示新霉素抗性基因。下列敘述正確的是

A. 圖甲中的質(zhì)粒用BamHⅠ切割后，含有4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)

B. 在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可用PstⅠ和BamHⅠ切割質(zhì)粒和外源DNA

C. 同時(shí)用PstⅠ和HindⅢ酶切，加入DNA連接酶后可得到兩種重組質(zhì)粒

D. 導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌可在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)

Answer 1

【答案】C

【解析】

分析題圖：質(zhì)粒和外源DNA分子都含有三種限制酶切點(diǎn)，即限制酶BamHⅠ、PstⅠ和Hind III，其中BamHⅠ切割位點(diǎn)在目的基因上，所以不能用該酶切割外源DNA了。用PstⅠ和Hind III酶切質(zhì)粒切成兩個(gè)片段，用PstⅠ和Hind III酶能將外源DNA切成三段，只有含目的基因的片段通過(guò)DNA連接酶與質(zhì)粒連接形成的重組質(zhì)粒符合要求，而另一個(gè)重組質(zhì)粒無(wú)目的基因，不符合要求，導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌，其重組質(zhì)粒是用PstⅠ和Hind III酶切割的，其中的Ampr（氨芐青霉素抗性基因）已被破壞，不能抗氨芐青霉素。

質(zhì)粒用BamHⅠ切割后將產(chǎn)生一個(gè)切口，打開(kāi)了2個(gè)磷酸二酯鍵，產(chǎn)生2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，故A錯(cuò)誤；由于目的基因中含有一個(gè)BamHⅠ的識(shí)別位點(diǎn)，若用BamHⅠ切割將破壞目的基因的結(jié)構(gòu)，故B錯(cuò)誤；目的基因兩側(cè)分別有PstⅠ和HindⅢ的識(shí)別位點(diǎn)，且質(zhì)粒也含有二者的識(shí)別位點(diǎn)，同時(shí)用這兩種酶切割時(shí)，目的基因與質(zhì)粒之間有一種符合要求的連接方式和一種不符合要求的連接方式，故C正確；PstⅠ的識(shí)別位點(diǎn)位于氨芐青霉素抗性基因中，用PstⅠ切割后，導(dǎo)致該抗性基因被破壞，從而造成導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌不具有抗氨芐青霉素的特性，故D錯(cuò)誤，故選C。