如圖是利用基因工程方法生產(chǎn)重組人生長激素的有關(guān)資料.圖中質(zhì)粒表示基因工程中經(jīng)常選用的載體--pBR322質(zhì)粒,Amp表示青霉素抗性基因,Tet表示四環(huán)素抗性基因.根據(jù)如圖回答下列問題(限制酶Pst,1、EcoR1和HindⅢ切割形成的末端均不相同);

(1)過程②需要
 
酶,得到的cDNA一般比從基因組文庫中獲得的目的基因要小的多,原因是
 
.過程④需要
 
酶,過程⑤中要提高成功率,常用
 
處理大腸桿菌.
(2)如果用限制酶Pst、EcoRⅠ和HindⅢ對(duì)質(zhì)粒-pBR322進(jìn)行切割,用一種酶、兩種酶和三種酶分別切割時(shí),則形成的DNA片段共
 
種.
(3)基因表達(dá)載體除了目的基因和抗性基因外,至少還有
 
等(至少答兩個(gè)).
(4)如果只用限制酶PstI切割目的基因和質(zhì)粒pBR322,完成過程④⑤后,將三角瓶內(nèi)的大腸桿菌(不含Amp′、Tet′抗性質(zhì)粒)先接種到甲培養(yǎng)基上,形成菌落后用無菌牙簽挑取甲上的單個(gè)菌落,分別接種到乙和丙兩個(gè)培養(yǎng)基的相同位置上,一段時(shí)間后,菌落的生長狀況如圖所示.接種到甲培養(yǎng)基上的目的是篩選
 
的大腸桿菌,含有目的基因的大腸桿菌在乙、丙培養(yǎng)基上的存活狀態(tài)是
 
 
,也可以用
 
方法進(jìn)行檢測(cè).
(5)酵母菌細(xì)胞也常常作為基因工程的受體細(xì)胞,與大腸桿菌等細(xì)胞相比,其優(yōu)點(diǎn)是在蛋白質(zhì)合成后,細(xì)胞可以對(duì)其進(jìn)行
 
并分泌到細(xì)胞外,便于提�。�
考點(diǎn):基因工程的原理及技術(shù)
專題:
分析:根據(jù)圖示可知,含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌能在四環(huán)素培養(yǎng)基中生存,但不能在青霉素培養(yǎng)基中生存,可知切割質(zhì)粒時(shí)應(yīng)選用的酶是限制酶PstI,破壞了青霉素抗性基因.甲、丙培養(yǎng)基中含有四環(huán)素,因此能在甲和丙中生長的大腸桿菌含有四環(huán)素抗性基因,包括導(dǎo)入普通質(zhì)粒和重組質(zhì)粒的大腸桿菌;乙培養(yǎng)基中含有四環(huán)素和青霉素,因此能在乙中生長的是導(dǎo)入普通質(zhì)粒的大腸桿菌.與丙相比,乙培養(yǎng)基中少了兩個(gè)菌落,說明丙培養(yǎng)基中這兩個(gè)菌落中的大腸桿菌成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒.
解答: 解:(1)過程②是mRNa合成DNA過程,為逆轉(zhuǎn)錄過程,需要逆轉(zhuǎn)錄酶.逆轉(zhuǎn)錄獲得的cDNA 中沒有內(nèi)含子,將目的基因與運(yùn)載體連接需要DNA連接酶.將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞,常用CaCl2 處理,使之成為感受態(tài)細(xì)胞.
(2)PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ分3種酶分別用1,2,3表示,一種酶酶切時(shí),一共可以得到3種不同長片段;兩種酶酶切時(shí),可得到1-2,2-1,2-3,3-2,1-3,3-1六種片段;三種酶酶切,可得到1-2,2-3,3-1三種片段,與前面重復(fù),因此一種可形成9種片段.
(3)基因表達(dá)載體包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn).
(4)在甲中能生長的是具有四環(huán)素抗性的細(xì)菌,含有四環(huán)素抗性基因;與丙相比,乙培養(yǎng)基中少了兩個(gè)菌落,說明丙培養(yǎng)基中這兩個(gè)菌落中的大腸桿菌成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒,而且目的基因插入質(zhì)粒后,破壞了青霉素抗性基因,使含有目的基因的大腸桿菌不能在含有青霉素的乙培養(yǎng)基上生長,但四環(huán)素基因是完好的,則含有目的基因的大腸桿菌能在含有四環(huán)素的丙培養(yǎng)基上生長.目的基因的檢測(cè)也可用DNA分子雜交法.
(5)酵母菌為真核生物,細(xì)胞內(nèi)具有對(duì)分泌蛋白加工的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等細(xì)胞器,細(xì)菌等原核生物,不具有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等細(xì)胞器.
故答案為:
(1)(逆)反轉(zhuǎn)錄    不含內(nèi)含子    DNA連接   Ca2+(或CaCl2溶液)
(2)9
(3)啟動(dòng)子、復(fù)制原點(diǎn)、終止子等
(4)含四環(huán)素抗性基因   在乙中不能存活   在丙中存活   DNA分子雜交
(5)加工(或修飾 )
點(diǎn)評(píng):本題考查了基因工程應(yīng)用的關(guān)知識(shí),考查了學(xué)生對(duì)相關(guān)知識(shí)的理解和掌握情況,對(duì)圖的分析判斷能力.
練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來源: 題型:

下列關(guān)于用高倍鏡觀察人的口腔上皮細(xì)胞線粒體實(shí)驗(yàn)的說法,不正確的是( �。�
A、牙簽消毒,實(shí)驗(yàn)前漱口都是為了保證該實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性
B、制裝片時(shí)在載玻片上滴一滴0.9%的NaCl溶液,目的是維持口腔上皮細(xì)胞的正常形態(tài)
C、在高倍鏡下觀察,可以看到被殺死細(xì)胞的線粒體呈藍(lán)綠色,而細(xì)胞質(zhì)接近無色
D、在高倍鏡下觀察,可以看到線粒體呈短棒狀,圓球狀,線形等

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科目:高中生物 來源: 題型:

回答下列生物有機(jī)物的相關(guān)問題
(1)動(dòng)植物細(xì)胞共有的糖有
 
 
是動(dòng)物細(xì)胞中的多糖.
(2)屬于固醇類物質(zhì)的有
 

(3)氨基酸脫水縮和過程中,脫去的水分子數(shù)=肽鍵數(shù)=
 
,環(huán)肽脫去的水分子數(shù)=
 

(4)構(gòu)成核酸的基本結(jié)構(gòu)單位是
 
,共有
 
種,含氮堿基共有
 
種,DNA特有的是
 
,RNA特有的是
 

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科目:高中生物 來源: 題型:

科學(xué)家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組,并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá).但在進(jìn)行基因工程的操作過程中,需使用特定的限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒,便于重組和篩選.已知限制性核酸內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-,限制性核酸內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-,據(jù)圖回答:

(1)圖1過程①所需要的酶是
 

(2)在構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中,應(yīng)用限制性核酸內(nèi)切酶
 
切割目的基因,用限制性核酸內(nèi)切酶
 
切割質(zhì)粒.用限制酶切割目的基因和運(yùn)載體后形成的黏性末端通過
 
原則進(jìn)行連接.人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組,原因是
 

(3)在過程③一般將受體大腸桿菌用
 
處理,以增大
 
的通透性,使含有目的基因的重組質(zhì)粒容易進(jìn)入受體細(xì)胞.
(4)將得到的大腸桿菌B涂布在一個(gè)含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上得到如圖2中a的結(jié)果(黑點(diǎn)表示菌落),能夠生長的細(xì)菌中已導(dǎo)入了
 
,反之則沒有導(dǎo)入;再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基a上,使絨布表面沾上菌落,然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖2中b的結(jié)果(空圈表示與a對(duì)照無菌落的位置).與圖2中b空圈相對(duì)應(yīng)的圖2的a中的菌落表現(xiàn)型是
 
,這些細(xì)菌中導(dǎo)入了
 

(5)人體的生長激素基因能在細(xì)菌體內(nèi)成功表達(dá)是因?yàn)?div id="oqyackl" class='quizPutTag' contenteditable='true'> 

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科目:高中生物 來源: 題型:

某化合物所含的元素有C、H、O、N、S,該化合物不可能具有的一項(xiàng)功能是( �。�
A、攜帶氨基酸進(jìn)入核糖體
B、識(shí)別突觸小泡釋放的遞質(zhì)
C、用于基因工程獲得黏性末端
D、催化葡萄糖在細(xì)胞內(nèi)氧化分解

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科目:高中生物 來源: 題型:

下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的說法,正確的是( �。�
A、制備固體培養(yǎng)基的操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、消毒、倒平板
B、分離能分解纖維素的細(xì)菌,要以纖維素作為培養(yǎng)基中唯一碳源
C、配置培養(yǎng)不同微生物的培養(yǎng)基時(shí)都要將pH調(diào)至中性或微堿性
D、在無氮培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑可用來鑒定尿素分解菌

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科目:高中生物 來源: 題型:

如圖表示動(dòng)物、植物細(xì)胞二合一亞顯微結(jié)構(gòu)模式圖.根據(jù)圖回答(括號(hào)內(nèi)填數(shù)字,橫線上填漢字):

(1)若某細(xì)胞同時(shí)含有A、B兩圖中各種細(xì)胞結(jié)構(gòu),則為
 
細(xì)胞.
(2)圖中不含磷脂的細(xì)胞器有
 

(3)結(jié)構(gòu)5為
 
,在植物細(xì)胞有絲分裂時(shí),與細(xì)胞壁的形成有關(guān).
(4)細(xì)胞內(nèi)有雙層膜結(jié)構(gòu)但又不屬于細(xì)胞器的是
 

(5)如果B圖為大蒜根成熟區(qū)細(xì)胞,則應(yīng)該沒有[
 
]
 

(6)若該細(xì)胞是西瓜果肉細(xì)胞,糖類主要存在于[
 
]
 
中.

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科目:高中生物 來源: 題型:

鐵皮石斛生長于陰濕環(huán)境,為研究強(qiáng)光對(duì)其光 合作用的影響,分別用強(qiáng)度為500、2000?mol?m-2?s-1的強(qiáng)光預(yù)處理20min,隨后將其置于弱光下 測(cè)定光合速率,結(jié)果如圖所示.以下分析正確的是 (凈光合速率為零時(shí)的光強(qiáng)度值稱為光補(bǔ)償點(diǎn))( �。�
A、鐵皮石斛最適光照強(qiáng)度為100μmol?m-2?s-1
B、強(qiáng)光預(yù)處理后,葉片固定光能的效率提高
C、預(yù)處理光照強(qiáng)度越大,隨后的呼吸強(qiáng)度越小
D、預(yù)處理光照強(qiáng)度越大,隨后的光補(bǔ)償點(diǎn)越大

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科目:高中生物 來源: 題型:

如圖所示葉面積指數(shù)與光合作用和呼吸作用的關(guān)系(葉面積指數(shù)是指單位土地面積上植物葉面積的數(shù)量.此值越大,表示植物葉片交錯(cuò)程度越大).圖中陰影部分表示的生理過程和森林合理開采的葉面積指數(shù)分別為( �。�
A、蒸騰作用失水量;6
B、光合作用積累有機(jī)物量;8
C、礦質(zhì)元素的含量;8
D、呼吸作用消耗有機(jī)物量;6

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