Question

某研究性學(xué)習(xí)小組同學(xué)想了解車廂“拉環(huán)”細(xì)菌的種類與含量對(duì)公眾健康的影響，選擇了地鐵公交作為研究對(duì)象．他們?cè)O(shè)計(jì)了有關(guān)的實(shí)驗(yàn)．
他們收集了有關(guān)的資料如下：
按照細(xì)菌對(duì)革蘭氏染色的反應(yīng)，可將細(xì)菌分為革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌．
牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌均可生長(zhǎng)，可用于細(xì)菌總數(shù)測(cè)定．麥康凱瓊脂培養(yǎng)基，能抑制革蘭氏陽(yáng)性菌生長(zhǎng)，是革蘭氏陰性菌的選擇培養(yǎng)基．革蘭氏陰性菌能分解乳糖產(chǎn)生乳酸的菌落，其周圍pH值降低因而菌落為紅色，不能分解乳糖的菌落（通常為致病菌）為白色．
產(chǎn)乳酸的革蘭氏陰性菌常用來(lái)指示腸道細(xì)菌的存在，表明可能存在腸道病原體污染，其中既有非致病菌，也有致病菌．常將此類細(xì)菌作為監(jiān)測(cè)環(huán)境衛(wèi)生的指標(biāo)．
《中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)---醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB15982-1995》規(guī)定，醫(yī)院普通病房、換藥治療室允許的總細(xì)菌數(shù)＜10cfu/cm²，即＜10個(gè)（菌落）/cm²．
（一）材料與方法．
1、取樣方法和過(guò)程：用浸有生理鹽水的棉球涂抹拉環(huán)后放入裝有3mL生理鹽水的試管，試管放置在盛有冰塊的冰盒內(nèi)條件下為宜，原因是

 

．采集樣品所用的生理鹽水、棉球、離心管等材料需作

 

處理．
2、細(xì)菌培養(yǎng)：將裝有取樣棉球的試管在振蕩器上劇烈振蕩5s，使細(xì)菌均勻分散于生理鹽水中．下列是細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)過(guò)程，請(qǐng)?jiān)贏、B（如圖）空格內(nèi)寫(xiě)出相應(yīng)的操作內(nèi)容．細(xì)菌計(jì)數(shù)：培養(yǎng)48小時(shí)后，對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)：

（1）在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落，計(jì)為

 

總數(shù)；
（2）在麥康凱培養(yǎng)基上的菌落，計(jì)為

 

總數(shù)．其中紅色菌落為

 

菌，白色菌落為

 

菌．
（二）結(jié)果與討論
地鐵拉環(huán)表面的平均細(xì)菌分布表（每個(gè)拉環(huán)手觸部分面積計(jì)為60cm²）：

項(xiàng)目	細(xì)菌數(shù)/拉環(huán)
平均細(xì)菌總數(shù)	532.4
單位面積平均細(xì)菌總數(shù)cfu/cm2	8.9
平均革蘭氏陰性菌總數(shù)	232.3
單位面積平均革蘭氏陰性菌總數(shù)cfu/cm2	3.9
單位面積平均乳糖發(fā)酵菌數(shù)cfu/cm2	2.1
單位面積平均非乳糖發(fā)酵菌數(shù)cfu/cm2	1.8
革蘭氏陰性菌占細(xì)菌總數(shù)比例	44%

討論：根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，參照上表數(shù)據(jù)，你可以得出什么結(jié)論？

Answer 1

考點(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng),培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用

專題：

分析：解答本題需掌握：
（1）按照細(xì)菌對(duì)革蘭氏染色的反應(yīng)，可將細(xì)菌分為革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌．
（2）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌均可生長(zhǎng)，可用于細(xì)菌總數(shù)測(cè)定．麥康凱瓊脂培養(yǎng)基，能抑制革蘭氏陽(yáng)性菌生長(zhǎng)，是革蘭氏陰性菌的選擇培養(yǎng)基．革蘭氏陰性菌能分解乳糖產(chǎn)生乳酸的菌落，其周圍pH值降低因而菌落為紅色，不能分解乳糖的菌落（通常為致病菌）為白色．

解答： 解：（一）1、在取樣過(guò)程中，用浸有生理鹽水的棉球涂抹拉環(huán)后放入裝有3mL生理鹽水的試管，試管放置在盛有冰塊的冰盒內(nèi)條件下為宜，原因是減少取樣細(xì)菌分裂增殖，采集樣品所用的生理鹽水、棉球、離心管等材料需作高壓蒸汽滅菌．
2、由題意知，A、B處理分別是取等量菌液樣品涂布于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上和取等量菌液樣品涂布于麥康凱培養(yǎng)基上．
（1）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是通用培養(yǎng)基，不具有選擇作用，故統(tǒng)計(jì)的是細(xì)菌總數(shù)．
（2）麥康凱培養(yǎng)基具有選擇作用，故統(tǒng)計(jì)的是革蘭氏陰性菌落，其中紅色菌落為乳糖發(fā)酵菌，白色菌落為非乳糖發(fā)酵菌．
（二）由表可知，拉環(huán)單位表面積平均細(xì)菌總數(shù)有8.9 cfu/cm²，小于10 cfu/cm²，即＜10個(gè)（菌落）/cm²，單位面積平均革蘭氏陰性菌總數(shù)3.9cfu/cm²，乳糖發(fā)酵細(xì)菌2.1cfu/cm²，非乳糖發(fā)酵菌數(shù)1.8cfu/cm²，因此，可以認(rèn)為地鐵總細(xì)菌含量相對(duì)較少，致病菌數(shù)量較少，對(duì)公眾安全不構(gòu)成威脅．
故答案為：
（一）1、減少取樣細(xì)菌分裂增殖    高壓蒸汽滅菌
2、A：取等量菌液樣品涂布于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上       B：取等量菌液樣品涂布于麥康凱培養(yǎng)基上
（1）細(xì)菌   
（2）革蘭氏陰性菌落    乳糖發(fā)酵    非乳糖發(fā)酵
（二）拉環(huán)單位表面積平均細(xì)菌總數(shù)有8.9 cfu/cm²，小于10 cfu/cm²，即＜10個(gè)（菌落）/cm²，單位面積平均革蘭氏陰性菌總數(shù)3.9cfu/cm²，乳糖發(fā)酵細(xì)菌2.1cfu/cm²，非乳糖發(fā)酵菌數(shù)1.8cfu/cm²，因此，可以認(rèn)為地鐵總細(xì)菌含量相對(duì)較少，致病菌數(shù)量較少，對(duì)公眾安全不構(gòu)成威脅

點(diǎn)評(píng)：本題主要考查微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的相關(guān)知識(shí)，意在考查考查考生對(duì)相關(guān)知識(shí)的理解，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力．