Question

10．研究表明，HER2/neu是一種原癌基因，它表達(dá)的H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細(xì)胞中過量表達(dá)．抗H蛋白單克隆抗體能抑制過量表達(dá)H蛋白的乳腺癌細(xì)胞的生長，目前已成為有效的生物治療手段．
（1）選擇H蛋白作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)，是因?yàn)镠蛋白在成年個(gè)體的正常組織中低表達(dá)（填“低表達(dá)”或“高表達(dá)”）．
（2）將H蛋白注射到小鼠體內(nèi)，取該小鼠的效應(yīng)B細(xì)胞（或漿細(xì)胞）細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是PEG（或聚乙二醇），也可用不同于植物細(xì)胞工程的誘導(dǎo)方法，即用滅活的病毒誘導(dǎo)融合．
（3）將各種融合細(xì)胞在選擇性培養(yǎng)基中培養(yǎng)進(jìn)行篩選，一段時(shí)間后培養(yǎng)基中只有雜交瘤細(xì)胞才能生長．之后還需要利用抗原-抗體雜交技術(shù)進(jìn)行抗體陽性檢測，其目的是為了篩選出能長生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（4）將篩選得到的細(xì)胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)，需用到的技術(shù)手段是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)．也可以將篩選得到的細(xì)胞注射到小鼠體內(nèi)增殖，從腹水中提取大量的單克隆抗體．
（5）治療乳腺癌時(shí)，可單獨(dú)使用抗H蛋白單克隆抗體，也可將該單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合構(gòu)建“生物導(dǎo)彈”，殺死癌細(xì)胞．這充分體現(xiàn)了單克隆抗體特異性強(qiáng)的特點(diǎn)．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體的制備過程是：對小動(dòng)物注射抗原，從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體．
2、誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有：物理法（離心、振動(dòng)）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）．
3、雜交瘤細(xì)胞具有既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體．

解答 解：（1）根據(jù)題意可知，H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細(xì)胞中過量表達(dá)，因此原癌基因的表達(dá)產(chǎn)物H蛋白在正常組織中低表達(dá)；
（2）在制備單克隆抗體過程中，需要將漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，誘導(dǎo)其融合的試劑為聚乙二醇，特有的融合方法是滅活的病毒誘導(dǎo)．
（3）將融合細(xì)胞接種在選擇培養(yǎng)基中，從中選出雜交瘤細(xì)胞，該培養(yǎng)基中只有雜交瘤細(xì)胞才能生長．利用抗原-抗體雜交技術(shù)最后選出產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（4）根據(jù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，細(xì)胞可以在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)．將雜交瘤細(xì)胞經(jīng)過體外培養(yǎng)或小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)，獲得大量的單克隆抗體．如果將篩選得到的細(xì)胞注射到小鼠體內(nèi)增殖，可以從腹水中提取大量的單克隆抗體．
（5）單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)，靈敏度高．
故答案為：
（1）低表達(dá)
（2）效應(yīng)B細(xì)胞（或漿細(xì)胞）    PEG（或聚乙二醇）  滅活的病毒
（3）選擇性培養(yǎng)基   雜交瘤    能長生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞
（4）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)      腹水
（5）特異性強(qiáng)

點(diǎn)評 本題結(jié)合抑制癌癥的材料考查了單克隆抗體的相關(guān)知識，要求考生能夠從題干和題圖中獲取有效解題信息；識記單克隆抗體的制備過程以及細(xì)胞融合的誘導(dǎo)技術(shù)，識記單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)等方面的知識．