Question

【題目】下圖是制備抗埃博拉病毒VP40蛋白的單克隆抗體的過程

(1)過程①中選用EcoRⅠ和XhoⅠ兩種限制酶切割的優(yōu)點(diǎn)是_________，此外還要用到________酶。

(2)過程②中首先需要用Ca2＋處理大腸桿菌，使其處于感受態(tài)，VP40基因進(jìn)入大腸桿菌后維持穩(wěn)定并表達(dá)的過程稱為______。

(3)與植物原生質(zhì)體融合相比，過程④特有的方法是用________處理。通常在選擇培養(yǎng)基中需加入抗生素，目的是________________________。選擇培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體________(填“是”或“不是”)單克隆抗體。

(4)圖示過程應(yīng)用的生物技術(shù)有______________________________________

Answer 1

【答案】防止自身環(huán)化 DNA連接 轉(zhuǎn)化 滅活的病毒 防止培養(yǎng)過程中的污染 不是 基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合

【解析】

制備抗埃博拉病毒VP40蛋白的單克隆抗體的過程，①是目的基因與運(yùn)載體結(jié)合，②是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，給老鼠注射特定的抗原蛋白：VP40蛋白引起小鼠的特異性免疫，產(chǎn)生特定B淋巴細(xì)胞，④過程是動(dòng)物細(xì)胞融合過程，據(jù)此答題即可。

（1）過程①中選用EcoRⅠ和XhoⅠ兩種限制酶切割可以使目的基因的兩端獲得不同的粘性末端，所以這樣處理的優(yōu)點(diǎn)是防止目的基因自身環(huán)化，此外目的基因與運(yùn)載體結(jié)合還需DNA連接酶。
（2）過程②是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，此過程首先需要用Ca2+處理大腸桿菌，使其處于感受態(tài)，VP40基因進(jìn)入大腸桿菌后維持穩(wěn)定并表達(dá)的過程稱為轉(zhuǎn)化。
（3）與植物原生質(zhì)體融合相比原理基本相同，植物原生質(zhì)體融合常用物理方法和化學(xué)方法，動(dòng)物細(xì)胞融合特有的方法是用滅活的病毒處理，通常在選擇培養(yǎng)基中需加入抗生素，目的是防止培養(yǎng)過程中的污染．選擇培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞，還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)過多次篩選才可以獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，所以選擇培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體不是單克隆抗體。
（4）圖示過程應(yīng)用的生物技術(shù)有：基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合。