Question

【題目】小明欲從土壤中分離尿素分解菌，請回答下列問題：

(1)土壤中的有些細菌能分解尿素，是因為其能合成_________。

(2)選取土樣后進行一系列稀釋，吸取0.1 mL的106倍稀釋的菌液在滅菌板上進行____接種，采用該種接種方法的目的是___________________________。該實驗過程中，還設置了一個空白平板，空白平板可起____作用。實驗結(jié)果顯示：平板上的菌落數(shù)為123、119、130，則每毫升土樣溶液中的活菌數(shù)為____個。

(3)其他同學認為小明的實驗結(jié)果偏大，可能原因是操作出現(xiàn)錯誤。為了排除其他同學的質(zhì)疑，你給小明的建議是________。

(4)為了鑒定分離出來的菌種是否為尿素分解菌，需要在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，根據(jù)顏色是否變____來鑒定。

Answer 1

【答案】脲酶 涂布 將聚集的細菌分散成單個細胞，從而獲得單個的菌落 對照 1.24×109 選取同樣的土樣重復實驗，吸取菌液時注意充分搖勻，若兩次實驗的結(jié)果基本相同，則說明沒有出現(xiàn)操作錯誤 紅

【解析】

1、平板冷凝后，要是有水滴滴到培養(yǎng)基上，會導致菌蔓延，這樣就不能計數(shù)，分離了。為防止冷凝水滴到培養(yǎng)基上，所以培養(yǎng)時平板一定要倒置；接種操作每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，是因為每次操作都要及時滅菌，以防污染雜菌。操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)的原因是防止雜菌污染環(huán)境。

2、在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱做選擇培養(yǎng)基。例如：在選擇培養(yǎng)基的配方中，將尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源，原則上只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長。

3、平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體，這就是純化的菌落。稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。

（1）土壤中的有些細菌能分解尿素，是因為其能合成分解尿素的脲酶。

（2）選取土樣后進行一系列稀釋，吸取0.1 mL的106倍稀釋的菌液在滅菌板上利用稀釋涂布平板法接種，采用該種接種方法的目的是將聚集的細菌分散成單個細胞，從而獲得單個的菌落。該實驗過程中，還設置了一個空白平板，空白平板可起對照作用。實驗結(jié)果顯示：平板上的菌落數(shù)為123、119、130，則每毫升土樣溶液中的活菌數(shù)為=[(123+119+130)÷3÷0.1]×106=1.24×109個。

（3）其他同學認為小明的實驗結(jié)果偏大，可能原因是操作出現(xiàn)錯誤。為了排除其他同學的質(zhì)疑，你給小明的建議是選取同樣的土樣重復實驗，吸取菌液時注意充分搖勻，若兩次實驗的結(jié)果基本相同，則說明沒有出現(xiàn)操作錯誤。

（4）為了鑒定分離出來的菌種是否為尿素分解菌，需要在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，根據(jù)顏色是否變紅色來鑒定。