Question

1．牛奶飲用前要經(jīng)過巴氏殺毒，以殺死有害微生物，為檢測消毒前后牛奶中細菌含量變化情況，作出如圖1所示操作．請回答：
（1）巴氏消毒的方法是在70～75℃煮30min或80℃煮15min，實驗這種方法對生牛奶進行殺毒的好處是可以殺死牛奶中的微生物，并且使牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞．
（2）取最終的牛奶稀釋液0.1ml，滴在培養(yǎng)基上進行涂布，應選擇的涂布工具是圖2中B．

（3）細菌培養(yǎng)產(chǎn)生的單個菌落在生態(tài)學上稱為種群．若用該方法培養(yǎng)設(shè)置了4個培養(yǎng)皿，菌落數(shù)分別為35個、18個、33個、34個，則可以推測生牛奶中每毫升含細菌數(shù)為3.4×10⁶個．
（4）今欲從牛奶中的某種細菌細胞內(nèi)分離提取某種限制酶，可以用電泳法，其原理是利用蛋白質(zhì)分子的大小、形狀和帶電荷性質(zhì)的不同產(chǎn)生不同的遷移速率來進行分離．為進一步鑒定該菌種，需從菌體中提取少量的DNA分子通過PCR技術(shù)擴增并檢測．
（5）為了檢測生牛奶中是否含有大腸桿菌，可以增加含有伊紅美蘭的培養(yǎng)基對生牛奶取樣培養(yǎng)，若得到的菌落表現(xiàn)為金屬光澤的紫黑色色，可判定其含有大腸桿菌．

Answer 1

分析 1、巴士消毒法是對一些不耐高溫的液體進行消毒的方法，該方法是在70～75℃煮30min或80℃煮15min；用這種方法對牛奶進行消毒，既可以殺死牛奶中的微生物，并且使牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞．
2、常用的微生物的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，平板劃線法接種工具是接種環(huán)，稀釋涂布平板法常用的接種工具是涂布器．
3、估算樣品菌落數(shù)應該選擇30～300的平板進行估算，估算的公式是：平板上平均菌落數(shù)÷涂布體積×稀釋的倍數(shù)．
4、由于不同大分子大小、形狀、帶電荷的性質(zhì)不同，產(chǎn)生遷移速率不同，因此可以用電泳方法來對生物大分子進行分離．
5、鑒定菌種常用的培養(yǎng)基是鑒別培養(yǎng)基．

解答 解：（1）巴士消毒法是對一些不耐高溫的液體進行消毒的方法，該方法是在70～75℃煮30min或80℃煮15min；用這種方法對牛奶進行消毒，既可以殺死牛奶中的微生物，并且使牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞．
（2）將牛奶稀釋進行涂布接種時要用涂布器，圖中A、B、C、D中B是涂布器．
（3）細菌培養(yǎng)產(chǎn)生的單個菌落一般來自同一個細菌繁殖，因此屬于同一物種，一個群落在生態(tài)學稱為一個種群；估算樣品菌落數(shù)應該選擇30～300的平板進行估算，圖圖1可知，牛奶被稀釋了10⁴倍，因此生牛奶中每毫升含細菌數(shù)為（35+33+34）÷3÷0.1÷10⁴=3.4×10⁶個．
（4）從牛奶中的某種細菌細胞內(nèi)某種酶，由于不同蛋白質(zhì)的分子的大小、形狀、帶電荷的性質(zhì)不同，產(chǎn)生遷移速率不同，因此可以用電泳方法來對蛋白質(zhì)進行分離；為進一步鑒定該菌種，需從菌體中提取少量的DNA分子通過PCR技術(shù)進行擴增、并檢測．、
（5）大腸桿菌在含有伊紅美蘭的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，形成的菌落呈紫黑色，且具有金屬光澤，因此可以用含有伊紅美蘭的培養(yǎng)基鑒定大腸桿菌．
故答案為：
（1）在70～75℃煮30min或80℃煮15min    可以殺死牛奶中的微生物，并且使牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞
（2）B
（3）種群  3.4×10⁶個
（4）電泳   帶電荷性質(zhì)   PCR
（5）含有伊紅美蘭   金屬光澤的紫黑色

點評 本題旨在考查學生對微生物的實驗室培養(yǎng)和應用的熟練掌握，并應用相關(guān)知識解決實際問題．