Question

根據(jù)基因工程的有關知識，回答下列問題：
（1）限制性內切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有

 

和

 

．
（2）質粒運載體用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如圖所示．為使運載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，還可用另一種限制性內切酶切割，該酶必須具有的特點是

 

．
（3）按其來源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即

 

DNA連接酶和

 

DNA連接酶．
（4）反轉錄作用的模板是

 

，產(chǎn)物是

 

．若要在體外獲得大量反轉錄產(chǎn)物，常采用

 

技術．
（5）基因工程中除質粒外，

 

和

 

也可作為運載體．
（6）若用重組質粒轉化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞，原因是

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：基因工程至少需要三種工具：限制性核酸內切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體．限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種．DNA連接酶分為兩類：E．coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶．基因工程常用的運載體：質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒．

解答： 解：（1）經(jīng)限制性核酸內切酶切割后能形成兩種類型的末端，即平末端和黏性末端．
（2）為了便于相連，兩種不同限制酶切割之后所產(chǎn)生的黏性末端必須相同．
（3）DNA連接酶分為兩類：E．coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶．這二者都能連接黏性末端，此外T₄DNA連接酶還可以連接平末端，但連接平末端時的效率比較低．
（4）反轉錄是以mRNA為模板逆轉錄先合成單鏈DNA，再合成雙鏈DNA，利用PCR技術進行大量擴增．
（5）基因工程常用的運載體：質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒．
（6）當受體細胞是細菌時，為了增大導入的成功率，常用Ca²⁺處理，得到感受態(tài)細胞，此時細胞壁和細胞膜的通透性增大，容易吸收重組質粒．未處理的大腸桿菌吸收質粒（外源DNA）的能力極弱．
故答案為：
（1）黏性末端   平末端
（2）切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRI切割產(chǎn)生的相同
（3）大腸桿菌   T4
（4）mRNA（或RNA）  cDNA（或DNA）   PCR
（5）噬菌體   動植物病毒
（6）未處理的大腸桿菌吸收質粒（外源DNA）的能力極弱

點評：本題考查基因工程的相關知識，重點考查基因工程的工具，只要考生識記基因工程三種工具的相關知識即可，屬于考綱識記層次的考查，這需要考生在平行的學習過程中構建相關知識網(wǎng)絡結構．