Question

（16分）傳統(tǒng)藥用植物栝樓的根、果、種子等均能入藥，其合成的天花粉蛋白是中藥天花粉的主要有效成分�，F(xiàn)科研人員進行以下的研究，大致流程如下：

（1）接種在MS培養(yǎng)基中的栝樓種子，如先經(jīng)加水浸沒的萌發(fā)率為75%，不加水浸沒的萌發(fā)率為2.5%，說明栝樓種子萌發(fā)需要 。

（2）在培育“無菌苗”過程中，使用的部分激素組合如表1（注：—表示未添加該種植物激素），除甲組僅有頂芽長成小苗外，所有的培養(yǎng)基上都有腋芽長出，可見誘導腋芽生長加入 是必需的。

（3）在誘導“愈傷組織”的MS培養(yǎng)基中，使用了以下一些激素組合（如表2），以上培養(yǎng)基均能誘導葉盤緩慢長出黃綠色的愈傷組織，其中組B2和組B3誘導產(chǎn)生的愈傷組織在培養(yǎng)30天后分化出小芽點，并迅速長大成無根苗，兩組的分化率分別為25.0%和14.3%�？梢�0.2mg/LNAA與激動素(6-BA等)配合可誘導栝樓葉片 長出愈傷組織，但不利于誘導愈傷組織 。

（4）科研人員從組培、栽培、野生栝樓的根中提取了總蛋白，并進行了分離與純化及精細分析，不同來源的根的蛋白質帶型差異較大。鑒定蛋白質純度常用 方法。分析結果顯示，栽培（移栽成活1個月的組培苗）和野生栝樓的根都檢測到了與對照天花粉蛋白相對應的 ，說明 基因在兩種來源的栝樓根細胞中的表達情況相同；而組培根中未觀察到任何明顯的雜交條帶，說明該基因的表達可能還需要 。

Answer 1

（1）充足的水分（水分、水）

（2）6—BA或NAA或6—BA和NAA（植物激素）

（3）脫分化 再分化

（4）凝膠電泳（SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝膠電泳） 特異性蛋白質帶型或特異性條帶 天花粉蛋白 一定的外界（環(huán)境）誘導條件（受一定的外界條件影響，受環(huán)境因素影響，）

【解析】

試題分析：

（1）從題意中可以看出，種子浸泡后萌發(fā)率提高，說明種子萌發(fā)過程中需要水分。

（2）比較表格中信息和實驗結果可以推測：只加入6—BA或NAA，或者6—BA和NAA二者均加入，都可以促進腋芽的生長。

（3）A1、B1和C1組中都是0.2mg/LNAA與激動素(6-BA等)配合，根據(jù)實驗結果，只出現(xiàn)愈傷組織，說明0.2mg/LNAA與激動素(6-BA等)配合可以促進脫分化過程，由于沒有長成幼苗，說明不利于再分化過程。

（4）鑒定和分離蛋白質純度可以采用凝膠電泳法進行分離；如果與對照組的特異性條帶相對應，說明這兩種細胞中都有天花粉蛋白，同時說明天花粉蛋白基因在這兩種細胞中都得到了表達；組培根中沒有觀察到相應的雜交條帶，說明天花粉蛋白基因的表達與外界環(huán)境因素有關。

考點：本題考查植物組織培養(yǎng)、蛋白質的提取和分離的有關知識，意在考查考生識圖能力和理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；能從課外材料中獲取相關的生物學信息，并能運用這些信息，結合所學知識解決相關的生物學問題。