Question

受損傷的馬鈴薯細(xì)胞內(nèi)酚氧化酶（PPO）和底物（酚類物質(zhì)）直接接觸,引起馬鈴薯的褐變。為探究溫度對PPO活性的影響,實驗小組進(jìn)行如下實驗。

（1）PPO粗提液的提取

低溫下將新鮮馬鈴薯用蒸餾水洗凈、去皮,取20 g樣品放入含50 mL磷酸緩沖液（pH為5．5）的研缽中,同時加入少量石英砂,研磨、離心,上清液即為PPO的粗提液。加緩沖液研磨的目的是 。

（2）不同溫度下PPO活性的測定

試管編號 步驟	1	2	3	4	5	6	7	8
加入PPO粗提液/mL	2	—	2	—	2	—	2	—
加入酚類底物/mL	—	2	—	2	—	2	—	2
反應(yīng)	混合振蕩	混合振蕩	混合振蕩	混合振蕩
溫度預(yù)處理（5 min）/℃	0	15	30	45
保溫時間/min	5	5	5	5
記錄結(jié)果	+	++++	++++	++

注:反應(yīng)底物充足;實驗結(jié)果中“+”越多,褐色越深

①實驗步驟順序有不妥之處,請改正: 。

②實驗結(jié)果表明:在溫度為15 ℃和30 ℃的條件下,PPO具有相同的活性,從酶的特性分析其原因是 。

③為進(jìn)一步探究PPO最適溫度,應(yīng)在 范圍內(nèi)設(shè)置溫度梯度。

Answer 1