Question

10．限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G^↓GATCC-，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-^↓GATC-．在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)．
（1）請(qǐng)畫出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端．
（2）請(qǐng)畫出目的基因兩側(cè)被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端．
（3）在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來？為什么？
能．因?yàn)椋阂驗(yàn)樗鼈冇邢嗤�的粘性末端�?

Answer 1

分析 關(guān)于限制酶，考生可以從以下幾方面把握：
（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來．
（2）特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端．

解答 解：（1）限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G^↓GATCC-，因此質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端為：．
（2）限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-^↓GATC-，因此目的基因兩側(cè)被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端為：．
（3）限制性內(nèi)切酶Ⅰ和限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)不同，但兩種切割形成的黏性末端相同，因此可在DNA連接酶的作用下連接起來．
故答案為：
（1）
（2）
（3）能    因?yàn)樗鼈冇邢嗤�的粘性末�?/p>

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握基因工程各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題；識(shí)記限制酶的作用特點(diǎn)，能結(jié)合限制性內(nèi)切酶Ⅰ和限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．