Question

20．如圖為采用基因工程技術生產海參溶菌酶（SL）的流程．請回答下列問題：

（1）過程I中首先在逆轉錄酶作用下合成海參溶菌酶cDNA，再以cDNA為模板擴增合成SL目的基因，擴增過程中要用到的酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶．
（2）過程II中構建基因工程表達載體時，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產生黏性末端，也可能產生平末端．若要在限制酶切割目的基因和質粒后使其直接進行連接，則應選擇能使二者產生相同（填“相同”或“不同”）黏性末端的限制酶．
（3）若要檢驗SL目的基因是否成功表達，可以用抗原-抗體雜交技術，若沒有出現相應的雜交帶，則需要用放射性同位素標記的目的基因做探針來檢驗是否轉錄出mRNA．
（4）溶菌酶廣泛存在于動物的組織、體液及分泌物中，主要通過破壞細菌的細胞壁細胞的裂解，在動物的非特異性免疫中發(fā)揮重要作用．

Answer 1

分析 分析題圖：Ⅰ表示以RNA為模板合成DNA的逆轉錄過程；Ⅱ表示構建基因表達載體并將目的基因導入受體細胞．

解答 解：（1）Ⅰ表示以RNA為模板合成DNA的逆轉錄過程，該過程需要逆轉錄酶的催化；擴增目的基因需要采用PCR技術，其技術需要在較高溫度下進行，因此需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶．
（2）限制酶切割既可產生黏性末端，也可產生平末端；切割目的基因和切割質粒最好使用同種限制酶，以產生相同的黏性末端．
（3）檢測目的基因是否表達出蛋白質可采用抗原-抗體雜交技術；探針是用放射性同位素標記的目的基因．
（4）溶菌酶主要通過破壞細菌的細胞壁而使細菌裂解；體液中的溶菌酶屬于免疫中的第二道防線，在非特異性免疫中有重要作用．
故答案為：
（1）逆轉錄酶     熱穩(wěn)定DNA聚合酶
（2）平     相同
（3）抗原-抗體雜交    放射性同位素標記的目的基因
（4）細胞壁      非特異性

點評 本題主要考查基因工程和免疫調節(jié)的相關知識，要求考生識記人體免疫系統(tǒng)的組成，掌握特異性免疫的具體過程；識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，盡管比較綜合，但難度不高．