Question

19．如圖表示從蘇云金芽孢桿菌獲取抗蟲基因（簡稱Bt基因）培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的圖解：

請回答：
（1）從蘇云金芽孢桿菌中切割抗蟲基因所用的工具是限制酶（限制性核酸內(nèi)切酶），它主要是從原核生物中分離純化出來的．
（2）將目的基因?qū)�入植物細胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（3）寫出b過程完整表達式：Bt基因$\stackrel{轉(zhuǎn)錄}{→}$mRNA$\stackrel{翻譯}{→}$原毒素．
（4）我國在“863”計劃資助下開展Bt抗蟲棉育種等研究，這將對環(huán)境保護（或農(nóng)業(yè)害蟲防治）和農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展產(chǎn)生巨大影響．
（5）基因工程是否成功可以在不同水平層次上進行檢測．在性狀水平上鑒定的方法是
直接觀察轉(zhuǎn)基因植物是否出現(xiàn)了所需性狀（鑒定轉(zhuǎn)基因生物是否表現(xiàn)出目的基因所控制的性狀）；在DNA水平上鑒定的方法是DNA分子雜交技術(shù)；在蛋白質(zhì)水平進行檢測的方法是從轉(zhuǎn)基因植株提取蛋白質(zhì)，進行抗原-抗體雜交，判斷是否產(chǎn)生雜交帶．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）獲取目的基因時需要限制酶（限制性核酸內(nèi)切酶）；限制酶主要是從原核生物中分離純化出來的．
（2）將目的基因?qū)�入植物細胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（3）b表示目的基因的表達過程，包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個步驟，其表達式為：Bt基因$\stackrel{轉(zhuǎn)錄}{→}$mRNA$\stackrel{翻譯}{→}$原毒素．
（4）我國在“863”計劃資助下開展Bt抗蟲棉、抗蟲水稻等研究，可以減少農(nóng)藥、殺蟲劑的使用．這將對環(huán)境保護起到重要作用．
（5）基因工程是否成功可以在不同水平層次上進行檢測．在性狀水平上鑒定的方法是直接觀察轉(zhuǎn)基因植物是否出現(xiàn)了所需性狀（鑒定轉(zhuǎn)基因生物是否表現(xiàn)出目的基因所控制的性狀）；在DNA水平上鑒定的方法是DNA分子雜交技術(shù)；在蛋白質(zhì)水平進行檢測的方法是從轉(zhuǎn)基因植株提取蛋白質(zhì)，進行抗原-抗體雜交，判斷是否產(chǎn)生雜交帶．
故答案為：
（1）限制酶（限制性核酸內(nèi)切酶）   原核生物
（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
（3）Bt基因$\stackrel{轉(zhuǎn)錄}{→}$mRNA$\stackrel{翻譯}{→}$原毒素
（4）環(huán)境保護（或農(nóng)業(yè)害蟲防治）
（5）直接觀察轉(zhuǎn)基因植物是否出現(xiàn)了所需性狀（鑒定轉(zhuǎn)基因生物是否表現(xiàn)出目的基因所控制的性狀）  DNA分子雜交技術(shù)     抗原-抗體雜交

點評 本題考查了基因工程的有關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)問題，能結(jié)合所學的知識準確答題．