Question

【題目】某生物興趣小組以α-淀粉酶為實驗材料進行系列實驗：一是用凝膠色譜法測定α-淀粉酶的相對分子質(zhì)量，二是用包埋法固定α-淀粉酶來探究固定化酶催化效果。請回答下列問題：

（1）凝膠色譜法的原理是__________________________。

（2）某人欲使用凝膠色譜法比較α-淀粉酶、唾液淀粉酶兩種蛋白質(zhì)的分子質(zhì)量大小，請你選擇需要的材料，借用下圖的實驗裝置，幫助其設(shè)計實驗步驟，并預(yù)測實驗結(jié)果，得出相關(guān)結(jié)論。

實驗步驟：將含有α-淀粉酶、唾液淀粉酶兩種蛋白質(zhì)的混合液加入裝滿凝膠的玻璃管上端，用_________________進行洗脫，檢測其_________________________。實驗結(jié)果及結(jié)論： _____________________。

（3）該小組同學(xué)用瓊脂作載體，用包埋法固定—淀粉酶來探究固定化酶催化效果。實驗結(jié)果如下：(注：假設(shè)加入試管中的固定化淀粉酶量與普通—淀粉酶量相同)

	1號試管	2號試管
固定化淀粉酶	√
普通—淀粉酶		√
淀粉溶液	√	√
60℃保溫5分鐘，取出冷卻至室溫，滴加碘液
現(xiàn)象	變藍	不變藍

①該實驗設(shè)計體現(xiàn)了________原則。

②1號試管變藍的原因是______________。

Answer 1

【答案】根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì) 緩沖液 洗脫的先后次序 若—淀粉酶先于唾液淀粉酶洗脫出來，則—淀粉酶的相對分子質(zhì)量大于唾液淀粉酶；若唾液淀粉酶先于—淀粉酶洗脫出來，則唾液淀粉酶的相對分子質(zhì)量大于—淀粉酶 對照原則、單一變量原則 因為淀粉分子太大難以通過瓊脂擴散與淀粉酶接觸而導(dǎo)致反應(yīng)無法進行

【解析】

凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動的速度快，因此相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離．

（1）凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)利的一種方法．

（2）α-淀粉酶與唾液淀粉酶是兩種不同的酶，其分子質(zhì)量不同，因此可用凝膠色譜法將其分離，其實驗步驟如下：實驗步驟：將含有α-淀粉酶、唾液淀粉酶兩種蛋白質(zhì)的混合液加入裝滿凝膠的玻璃管上端，用緩沖液進行洗脫，檢測其洗脫的先后次序．實驗結(jié)果及結(jié)論：若—淀粉酶先于唾液淀粉酶洗脫出來，則—淀粉酶的相對分子質(zhì)量大于唾液淀粉酶；若唾液淀粉酶先于—淀粉酶洗脫出來，則唾液淀粉酶的相對分子質(zhì)量大于—淀粉酶．

（3）①該實驗中設(shè)置了對照組（2號試管），而且只有一個變量（加入的酶是固定化淀粉酶還是普通α-淀粉酶），因此體現(xiàn)了對照原則和單一變量原則．
②1號試管中加入的是固定化淀粉酶，由于淀粉分子太大難以通過瓊脂擴散與淀粉酶接觸，因而導(dǎo)致反應(yīng)無法進行，所以加碘液后變藍．