Question

某細(xì)菌培養(yǎng)的組成成分是KH₂PO₄、Na₂HPO₄、MgSO₄、葡萄糖、尿素和蒸餾水，請你回答下列相關(guān)問題：
（1）若要制作的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)，在上述成分中還應(yīng)加入

 

，該培養(yǎng)基中的碳源是

 

，氮源是

 

．從同化作用類型看，用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)菌屬于

 

．
（2）若只有能合成脲酶的細(xì)菌才能在該培養(yǎng)基上生長，則該培養(yǎng)基屬于

 

培養(yǎng)基．脲酶可以將尿素分解為NH₃，從而使尿素溶液pH升高，這可用

 

試劑來檢驗(yàn)．為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明這種細(xì)菌利用尿素的能力

 

，脲酶活性強(qiáng)，含量多．
（3）微生物培養(yǎng)基的配制和接種等環(huán)節(jié)都需要嚴(yán)格做好無菌操作，包括滅菌和消毒兩種方式，對實(shí)驗(yàn)者的雙手需要

 

，培養(yǎng)基、接種環(huán)、培養(yǎng)皿等需要

 

．在培養(yǎng)基配制時，滅菌與調(diào)pH的先后順序是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng)

專題：

分析：1、培養(yǎng)基的基本成分：水、無機(jī)鹽、碳源、氮源及特殊生長因子；
2、無菌操作，包括滅菌和消毒兩種方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；滅菌的方法有干熱滅菌、灼燒滅菌和高壓蒸汽滅菌；
3、微生物的接種：微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，常用來統(tǒng)計(jì)樣品活菌數(shù)目的方法是稀釋涂布平板法．
4、微生物的鑒定：計(jì)培養(yǎng)基配方時，從用途來看，除加入必需的營養(yǎng)成分外，還應(yīng)以尿素唯一氮源；從物理性質(zhì)來看，還應(yīng)加入瓊脂．接種培養(yǎng)后，依據(jù)培養(yǎng)基中是否產(chǎn)生透明圈來篩選能合成脲酶的細(xì)菌．

解答： 解：（1）瓊脂是固體培養(yǎng)基的凝固劑．為微生物提供的營養(yǎng)物質(zhì)中，含有碳元素的是葡萄糖，含有氮元素的是尿素．該培養(yǎng)基中含有葡萄糖，因而適合進(jìn)行異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)．
（2）該培養(yǎng)基中只有能合成脲酶的細(xì)菌才能生長，故為選擇培養(yǎng)基．由于細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶向周圍擴(kuò)散，將培養(yǎng)基中的尿素分解，產(chǎn)生的氨使培養(yǎng)基呈堿性，酚紅指示劑變紅．這表明以尿素為氮源的細(xì)菌分泌了脲酶，并分解了尿素．圓形紅色區(qū)域越大，表明這種細(xì)菌利用尿素的能力越強(qiáng)，脲酶活性越強(qiáng)，含量越多．
（3）滅菌和消毒的對象不同，消毒針對人體和生物材料，培養(yǎng)基及其他用具等可以進(jìn)行滅菌．在配制培養(yǎng)基時應(yīng)先調(diào)節(jié)pH，后進(jìn)行滅菌，防止滅菌后在調(diào)節(jié)pH的過程中污染培養(yǎng)基．
故答案為：
（1）瓊脂    葡萄糖    尿素   異養(yǎng)型
（2）選擇    酚紅   強(qiáng)
（3）消毒    滅菌    先調(diào)pH，后滅菌

點(diǎn)評：微生物這部分內(nèi)容是高考試題的一個熱點(diǎn)一般體現(xiàn)在對相關(guān)實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容上，考察的知識點(diǎn)有微生物的無菌操作、微生物的分離以及鑒定，注意總結(jié)．