Question

20．根據(jù)所學生物學知識回答下列問題：
（1）目前臨床上使用的紅細胞生成素（一種糖蛋白，用于治療腎衰性貧血）主要來自基因工程技術生產(chǎn)的重組人紅細胞生成素（rhEPO）．檢測rhEPO的體外活性需用抗rhEPO的單克隆抗體．分泌該單克隆抗體的雜交瘤細胞，可由rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合而成，在融合過程中至少需要進行2次篩選．
（2）在“試管�！钡呐嘤�過程中，采用激素處理可使良種母牛一次排出多枚卵母細胞，最常用的激素是促性腺激素．從良種公牛采集的精子需獲能后才能進行受精作用；防止多精入卵的兩道屏障依次為透明帶反應、卵黃膜封閉作用
（3）生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)即使某個物種由于某種原因而死亡，也會很快有其他物種占據(jù)它原來的生態(tài)位置，從而避免系統(tǒng)結(jié)構(gòu)或功能失衡．這體現(xiàn)了生態(tài)工程的什么原理B
A．協(xié)調(diào)與平衡原理      B．物種多樣性原理      C．物質(zhì)循環(huán)再生原理      D．整體性原理
（4）農(nóng)桿菌介導法轉(zhuǎn)基因需要利用農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒完成，圖1是Ti質(zhì)粒的具體組成．（T-DNA區(qū)大小約17kb）

①若將圖1中質(zhì)粒用限制酶I與限制酶II進行完全酶切（各個片段大小不一致），并用凝膠電泳分離酶切后的片段，則電泳結(jié)果應為圖2（箭頭為電泳方向）中的A．
②為了篩選符合條件的農(nóng)桿菌，可以在培養(yǎng)基中加入卡那霉素進行篩選．則可以在此培養(yǎng)基中生存的農(nóng)桿菌類型為導入未重組的Ti質(zhì)粒農(nóng)桿菌及導入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌．
③農(nóng)桿菌介導法轉(zhuǎn)基因原理如圖3所示．當植物受傷時會產(chǎn)生一種信號分子，該信號會作用于農(nóng)桿菌細胞表面的受體．試分析接受信號分子后農(nóng)桿菌將T-DNA導入植物細胞的過程：激活vir區(qū)表達蛋白裝配成通道復合體；激活vir區(qū)表達蛋白以誘導T-DNA區(qū)形成T復合體通過通道復合體進入植物細胞后整合進入植物基因組DNA．

Answer 1

分析 1、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體．
3、胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體．用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對胚胎進行移植；⑤移植后的檢查．

解答 解：（1）單克隆抗體是由雜交瘤細胞分泌的；雜交瘤細胞可由rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合而成，在融合過程中至少需要進行2次篩選，第一次是篩選雜交瘤細胞，第二次是篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞．
（2）給良種母牛注射促性腺激素可促使其超數(shù)排卵；精子需要獲能后才能進行受精作用；防止多精入卵的兩道屏障依次為 透明帶反應、卵黃膜封閉作用．
（3）生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)即使某個物種由于某種原因而死亡，也會很快有其他物種占據(jù)它原來的生態(tài)位置，從而避免系統(tǒng)結(jié)構(gòu)或功能失衡，這體現(xiàn)了生態(tài)工程的物種多樣性原理．
（4）①圖1中質(zhì)粒有2個限制酶Ⅰ的切割位點，也有2個限制酶Ⅱ的切割位點，且該質(zhì)粒用限制酶I與限制酶II進行完全酶切后產(chǎn)生的各個片段大小不一致，其中有一個片段比較大．因此，該質(zhì)粒被限制酶I與限制酶II進行完全酶切后能產(chǎn)生4種大小不同的片段．故選：A．
②由于質(zhì)粒中含有卡那霉素抗性基因，所以在培養(yǎng)基中加入卡那霉素進行篩選后，可以在此培養(yǎng)基中生存的農(nóng)桿菌類型為導入未重組的Ti質(zhì)粒農(nóng)桿菌及導入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌．
③根據(jù)圖3，當植物受傷時會產(chǎn)生一種信號分子，該信號會作用于農(nóng)桿菌細胞表面的受體．接受信號分子后農(nóng)桿菌將T-DNA導入植物細胞的過程為：激活vir區(qū)表達蛋白裝配成通道復合體；激活vir區(qū)表達蛋白以誘導T-DNA區(qū)形成T復合體通過通道復合體進入植物細胞后整合進入植物基因組DNA．
故答案為：
（1）雜交瘤      2
（2）促性腺激素    獲能     透明帶反應、卵黃膜封閉作用
（3）B
（4）①A
②導入未重組的Ti質(zhì)粒農(nóng)桿菌及導入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌
③受體      激活vir區(qū)表達蛋白裝配成通道復合體；激活vir區(qū)表達蛋白以誘導T-DNA區(qū)形成T復合體通過通道復合體進入植物細胞后整合進入植物基因組DNA

點評 本題結(jié)合圖解，綜合考查基因工程、胚胎工程和生態(tài)工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，能結(jié)合圖中信息答題；識記體外受精的過程及胚胎移植的基本程序；識記生態(tài)工程的基本原理，能結(jié)合所學的知識準確答題．