Question

1．下列是利用植物生產(chǎn)抗艾滋病病毒的藥物過程，請據(jù)圖回答：

（1）獲取目的基因的常用方法是基因文庫中獲取、人工合成和PCR技術(shù)擴(kuò)增．若用PCR技術(shù)擴(kuò)增抗旱基因，需要用到的酶是熱穩(wěn)定性DNA聚合酶．
（2）圖中構(gòu)成B的組件除抗旱基因、啟動子、終止子外，還有標(biāo)記基因，在構(gòu)建此結(jié)構(gòu)時A基因和Ti質(zhì)粒結(jié)合的部位是T-DNA片段內(nèi)．
（3）圖中③目的基因?qū)�入煙草�?xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，除此之外導(dǎo)入植物受體細(xì)胞的方法還可以是花粉管通道法和基因槍法．
（4）含有目的基因的受體細(xì)胞培養(yǎng)成煙草植株的培養(yǎng)基中，除加入一定的營養(yǎng)成分外，還需要添加植物激素，同時除提供適宜的溫度、光照和氧氣等環(huán)境條件外，成功的關(guān)鍵是無菌操作．
（5）與該培養(yǎng)過程所用培養(yǎng)基相比，用于動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液除含有水分，無機(jī)鹽、糖類、維生素以及氨基酸之外，還需要添加血清、血漿．

Answer 1

分析 1、基因工程的工具有：限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和運載體．需要限制酶來切割以獲取目的基因，同時需要相同的限制酶切割運載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過DNA連接酶連接目的基因和運載體．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．基因表達(dá)載體的組成包括：目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因等．標(biāo)記基因的作用是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．例：用蟲食用棉花，觀察其存活情況，來鑒定棉花是否具有抗蟲特性．
2、圖示過程為基因工程流程，①是構(gòu)建基因表達(dá)載體，②將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，③目的基因?qū)�入煙草�?xì)胞，然后經(jīng)過植物組織培養(yǎng)獲得完整植株個體．

解答 解：（1）獲取目的基因的常用方法有基因文庫中獲取、人工合成和PCR技術(shù)擴(kuò)增等，其中PCR技術(shù)需要用熱穩(wěn)定性DNA聚合酶．
（2）圖中B為重組質(zhì)粒，其結(jié)構(gòu)包括抗旱基因（目的基因）、啟動子、終止子外、標(biāo)記基因，在構(gòu)建此結(jié)構(gòu)時A基因和Ti質(zhì)粒結(jié)合的部位是T-DNA片段內(nèi)．
（3）圖中③目的基因?qū)�入煙草�?xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，還可以用花粉管通道法和基因槍法．
（4）決定脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類及比例，因此在培養(yǎng)過程中，除添加必要的營養(yǎng)物質(zhì)，還需要向培養(yǎng)基中添加植物激素；植物組織培養(yǎng)時除提供適宜的溫度、光照和氧氣等環(huán)境條件外，成功的另一關(guān)鍵是無菌操作．
（5）動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分：水分、無機(jī)鹽、糖類、維生素以及氨基酸等之外，還要加入動物血清．
故答案為：
（1）基因文庫中獲取   人工合成   熱穩(wěn)定性DNA聚合酶
（2）標(biāo)記基因   T-DNA片段內(nèi)
（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法  花粉管通道法和基因槍法
（4）植物激素    無菌操作
（5）血清、血漿

點評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，意在考查考生能運用所學(xué)知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或的能力．要注意，基因表達(dá)載體的構(gòu)建是在生物體外完成的．PCR是一項在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)．通過這一技術(shù)，可以獲取大量的目的基因．農(nóng)桿菌能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物，而對大多數(shù)單子葉植物沒有感染能力．