【題目】DNA分子由兩條反向平行的脫氧核苷酸鏈組成。DNA復(fù)制時(shí),一條子鏈?zhǔn)沁B續(xù)合成的,另一條子鏈?zhǔn)遣贿B續(xù)合成的(即先形成短鏈片段再相互連接),這種復(fù)制方式稱為半不連續(xù)復(fù)制,如圖1。

(1)DNA復(fù)制時(shí),子鏈延伸的方向?yàn)?/span>____________(DNA單鏈中具有游離磷酸基團(tuán)的一端稱為5’末端),這一過(guò)程需要_______酶催化,該酶作用的機(jī)理是__________________。

(2)半不連續(xù)復(fù)制是1966年日本科學(xué)家岡崎提出的。為驗(yàn)證假說(shuō),他進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn):讓T4噬菌體在20℃時(shí)侵染大腸桿菌70min后,將同位素3H標(biāo)記的脫氧核苷酸添加到大腸桿菌的培養(yǎng)基中,在2秒、7秒、15秒、30秒、60秒、120秒后,分離T4噬菌體DNA并通過(guò)加熱使DNA分子變性、全部解螺旋,再進(jìn)行密度梯度離心,以DNA單鏈片段分布位置確定片段大。ǚ肿釉叫‰x試管口距離越近),并檢測(cè)相應(yīng)位置DNA單鏈片段的放射性,結(jié)果如圖2。

①在噬菌體DNA中能夠檢測(cè)到放射性,其原因是_______________________________

②研究表明,富含G-C堿基的DNA分子加熱變性時(shí)需要的溫度較高。推測(cè)其原因是_____________________

③圖2中,與60秒結(jié)果相比,120秒結(jié)果中短鏈片段的量_______,原因是___________。

④研究還發(fā)現(xiàn)提取的噬菌體DNA上緊密結(jié)合了一些小RNA,根據(jù)PCR反應(yīng)所需條件推測(cè),RNA的作用是____________________。

【答案】 5’→3’ DNA聚合 降低反應(yīng)的活化能 3H標(biāo)記的脫氧核苷酸被大腸桿菌吸收,為噬菌體DNA復(fù)制提供原料 DNA分子中G+C的比例高,氫鍵較多,分子結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定 減少 短鏈片段連接成長(zhǎng)鏈片段 作為子鏈延伸的引物

【解析】本題考查DNA的復(fù)制過(guò)程,意在考察考生對(duì)知識(shí)點(diǎn)的理解和對(duì)題意信息的分析、提取和應(yīng)用能力。

(1)DNA是反向平行的,由圖可知新鏈的形成方向都是從5’→3’,DNA形成需要DNA聚合酶的催化,其作用機(jī)理是降低反應(yīng)所需的活化能。

(2)①在噬菌體DNA中能夠檢測(cè)到放射性,其原因是同位素3H標(biāo)記的脫氧核苷酸添加到大腸桿菌的培養(yǎng)基中,大腸桿菌吸收了3H標(biāo)記的脫氧核苷酸,此時(shí)大腸桿菌有3H標(biāo)記的脫氧核苷酸又可以為噬菌體DNA復(fù)制提供原料,所以噬菌體DNA中能夠檢測(cè)到放射性。

②富含G-C堿基的DNA分子加熱變性時(shí)需要的溫度較高,可能是因?yàn)镈NA分子中G+C的比例高,氫鍵較多,分子結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定。

③在圖2中分子越小離試管口距離越近,所以分析圖2可知,與60秒結(jié)果相比,120秒結(jié)果中短鏈片段的量減少,應(yīng)是因?yàn)槎替溒卧贒NA連接酶的作用下被連接成長(zhǎng)鏈片段。

④研究還發(fā)現(xiàn)提取的噬菌體DNA上緊密結(jié)合了一些小RNA,在PCR復(fù)制過(guò)程中需要引物結(jié)合到模板鏈上,所以根據(jù)PCR反應(yīng)所需條件推測(cè),RNA的作用是作為子鏈延伸的引物。

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