Question

12．關于果酒和果醋的制作的實驗，請回答下列問題：
I．（1）果酒和果醋的制作分別利用了酵母菌和醋酸桿菌兩種微生物的發(fā)酵原理．后者在結構上的主要特點是無成形的細胞核．
（2）影響上述微生物發(fā)酵的主要因素有氧氣、溫度（兩項即可）．
（3）在制葡萄酒的過程中，在不同時間內對發(fā)酵液樣品進行檢測，發(fā)現發(fā)酵液的pH一直下降，原因是酵母菌呼吸作用產生的二氧化碳使發(fā)酵液pH值下降．
II．在培養(yǎng)菌種時，為了檢測菌種，以無菌操作技術進行以下實驗操作：
①將1g樣品溶于無菌水，定容為10ml．
②對上述菌液進行4次梯度稀釋：取1ml前一種稀釋菌液+9ml無菌水，搖勻．
③吸取0.1ml最后一次稀釋所得菌液涂布于細菌培養(yǎng)基平板上．
④將平板放在37°C恒溫環(huán)境中培養(yǎng)24h后，計數平板上菌落數目．假如計數得平板菌落數為5．
（1）題中所采用的計數法是稀釋涂布平板法，樣品含活菌數約為5×10⁶個/g．樣品的實際含菌數比這個數據多（填多、少），原因是某些菌落可能由多個（兩個以上）的酵母菌繁殖而來．
（2）為了使所得菌體數目更加準確，應該多涂布幾個平板，再計算平板菌落數的平均值．

Answer 1

分析 1、果酒制作時使用的是酵母菌，酵母菌適宜在缺氧、含糖量高、呈酸性的溶液中大量繁殖，酵母菌發(fā)酵的適宜溫度是18℃～25℃；果醋制作使用的是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，醋酸菌發(fā)酵的適宜溫度是30℃～35℃．
2、稀釋涂布平板法常用來進行微生物的分離、篩選與計數．用該方法進行計數要比實際數目偏少．為計數準確常常需要進行重復實驗．

解答 解：I．（1）果酒和果醋的制作分別利用了酵母菌和醋酸桿菌兩種微生物的發(fā)酵原理．酵母菌是真核生物，醋酸桿菌是原核生物，后者在結構上的主要特點是無成形的細胞核．
（2）影響上述微生物發(fā)酵的主要因素有氧氣、溫度．
（3）在制葡萄酒的過程中，在不同時間內對發(fā)酵液樣品進行檢測，酵母菌呼吸作用產生的二氧化碳使發(fā)酵液pH值下降．
Ⅱ（1）根據題意，題目中的計數方法為稀釋涂布平板法，樣品含活菌數約為50÷0.1×10⁴=5×10⁶個/g．由于某些菌落可能由多個（兩個以上）的酵母菌繁殖而來，所以樣品的實際含菌數比這個數據要多．
（2）為了使所得菌體數目更加準確，應該多涂布幾個平板，再計算平板菌落數的平均值．
故答案為：
I（1）醋酸桿菌      無成形的細胞核
（2）氧氣、溫度
（3）酵母菌呼吸作用產生的二氧化碳使發(fā)酵液pH值下降
II（1）稀釋涂布平板法   5×10⁶    多    某些菌落可能由多個（兩個以上）的酵母菌繁殖而來
（2）多涂布幾個平板，再計算平板菌落數的平均值

點評 本題考查果酒和果醋的制作，稀釋涂布平板法的計數，意在強化學生對微生物計數的相關知識的理解與掌握．是一道基礎性題目．