Question

請分析下面一項專利：

申請專利號	03109739.1	專利申請日	2003.04.14
名稱	利用轉(zhuǎn)基因番茄生產(chǎn)胰島素的方法	公開號	1458161
公開日	2003.11.26	申請（專利權(quán)）	林忠平
地址	北京市北京大學生命科學學院	發(fā)明（設計）人	林忠平、倪挺、陳溪、胡鳶雷
專利摘要	本發(fā)明利用轉(zhuǎn)基因番茄作為生物反應器生產(chǎn)人胰島素，所用的人胰島素基因是依據(jù)植物偏愛密碼子的原則來設計所含的密碼子，通過人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在C端上加上KSEL的內(nèi)置網(wǎng)滯序列，避免胰島素在植物細胞中的降解．將該基因置于CaMV35S啟動子和果實專一性啟動子2A12的驅(qū)動之下通過農(nóng)桿菌介導的方法轉(zhuǎn)入番茄中，在番茄的果實中表達人胰島素．

（1）此基因工程中，目的基因是

 

．將人工合成的DNA片段拼接在一起，所必需的酶是

 

．
（2）試分析在C端加上KDEL的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留序列，為什么可以避免胰島素在植物細胞中的降解？

 

．
（3）用目的基因與農(nóng)桿菌的

 

結(jié)合構(gòu)建表達載體．目的基因能否在番茄中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是

 

，檢測受體細胞中是否存在目的基因可采用

 

技術(shù)．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析表格：表中為一項專利的基本信息．該專利的名稱是利用轉(zhuǎn)基因番茄生產(chǎn)胰島素的方法，可見該專利采用的基因工程技術(shù)，目的基因是人胰島素基因，且所用的人胰島素基因是人工合成的，將該基因置于CaMV35S啟動子和果實專一性啟動子2A12的驅(qū)動之下通過農(nóng)桿菌介導的方法轉(zhuǎn)入番茄中，在番茄的果實中表達人胰島素．

解答： 解：（1）根據(jù)表中信息“本發(fā)明利用轉(zhuǎn)基因番茄作為生物反應器生產(chǎn)人胰島素”可知此基因工程中，目的基因是人胰島素基因；要將人工合成的DNA片段拼接在一起，需先用同種限制酶切割DNA片段形成相同的黏性末端，還需用DNA連接酶將DNA片段拼接在一起．
（2）在C端加上KDEL的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留序列，可使胰島素合成后在植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中保存，這樣可以避免胰島素在植物細胞中的降解．
（3）基因工程常用的運載體是質(zhì)粒、動植物病毒和噬菌體，因此本題是用目的基因與農(nóng)桿菌的質(zhì)粒（或Ti質(zhì)粒）結(jié)合構(gòu)建表達載體；目的基因能否在番茄中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是番茄染色體DNA上是否插入了目的基因，檢測受體細胞中是否存在目的基因可采用DNA分子雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）人胰島素基因       限制（性核酸內(nèi)切）酶、DNA連接酶
（2）使胰島素合成后在植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中保存，以免在細胞內(nèi)被降解
（3）質(zhì)粒（或Ti質(zhì)粒）    番茄染色體DNA上是否插入了目的基因     DNA分子雜交

點評：本題以一項專利的信息為載體，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的工具及操作步驟，能分析表中內(nèi)容提取有效信息答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．