Question

9．利用相關(guān)工程技術(shù)可以獲得抗黑腐病雜種黑芥-花椰菜植株，已知野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，技術(shù)人員用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力，再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，流程如下圖．

據(jù)圖回答下列問題：
（1）該過程用到的工程技術(shù)有植物體細胞雜交和植物組織培養(yǎng)．
（2）過程①所需的酶是纖維素酶和果膠酶，過程②PEG的作用是促進原生質(zhì)體的融合，經(jīng)過②操作后，需篩選出融合的雜種細胞，顯微鏡下觀察融合的活細胞中有供體的葉綠體存在可作為初步篩選雜種細胞的標志．
（3）原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是保持原生質(zhì)體完整性．原生質(zhì)體經(jīng)過細胞壁再生，進而分裂和脫分化形成愈傷組織．
（4）若分析再生植株的染色體變異類型，應剪取再生植株和雙親植株的根尖，制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目；將雜種植株栽培在含有黑腐病菌的環(huán)境中，可篩選出具有高抗性的雜種植株．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為采用植物體細胞雜交技術(shù)獲得抗黑腐病雜種植株的流程圖，其中①表示采用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細胞壁的過程；②表示誘導原生質(zhì)體融合的過程；之后再采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)即可得到雜種植株．

解答 解：（1）圖中先去掉兩種植物細胞的細胞壁，然后誘導融合獲得雜種細胞，再通過植物組織培養(yǎng)獲得雜種植株，該過程是植物體細胞雜交．
（2）指望細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性原理，可采用纖維素酶和果膠酶去掉植物細胞的細胞壁；聚乙二醇（PEG）的作用是促進原生質(zhì)體融合．
（3）去掉細胞壁后獲得的原生質(zhì)體需要放在適宜濃度的甘露醇溶液中，保持原生質(zhì)體完整性，避免失水或吸水；在植物組織培養(yǎng)中，經(jīng)過脫分化后形成愈傷組織．
（4）由于染色體在顯微鏡下能看見，因此可以制作臨時裝片，觀察染色體的形態(tài)和數(shù)目，以確定是否發(fā)生染色體變異；對雜種植物進行鑒定最簡單的方法是從個體水平上進行檢測，即接種黑腐病菌，觀察植物的性狀．
故答案為：
（1）植物體細胞雜交  植物組織培養(yǎng)
（2）纖維素酶和果膠酶    促進原生質(zhì)體的融合 
（3）保持原生質(zhì)體完整性   愈傷組織  
（4）形態(tài)和數(shù)目  黑腐病菌

點評 本題結(jié)合培育抗黑腐病雜種植株的流程圖，考查植物體細胞雜交的相關(guān)知識，要求考生識記植物體細胞雜交的概念、過程及意義，能正確分析題圖，再結(jié)合所學的知識準確答題．