Question

【題目】乳腺炎和口蹄疫分別是由細菌和病毒引起的危害奶牛養(yǎng)殖業(yè)的兩種嚴重疾病。研究者利用生物技術(shù)培育出轉(zhuǎn)乳鐵蛋白肽(抗細菌）和人干擾素(抗病毒）的雙轉(zhuǎn)基因奶牛新品種。下圖1為基因表達載體，圖2為培育流程。

（1）培育雙轉(zhuǎn)基因奶牛涉及的生物技術(shù)有___________(至少2項）。

（2）牛乳鐵蛋白肽基因能在轉(zhuǎn)基因奶牛的乳腺細胞表達，人干擾素基因則可在全身細胞表達，這與構(gòu)建表達載體時_____________的選擇有關(guān)。據(jù)圖可知，干擾素基因與___________基因可同時轉(zhuǎn)錄，但在翻譯時，核糖體可識別mRNA上IRES序列的對應(yīng)部分，啟動另一種肽鏈的合成，因此用含有新霉素的培養(yǎng)基可篩選出__________。

（3）將基因?qū)�入牛胎兒成纖維細胞前，需用______________將其處理成單個細胞。成纖維細胞無法直接發(fā)育成個體，需要去核卵母細胞的細胞質(zhì)誘導(dǎo)，以實現(xiàn)細胞核的_______________。

（4）研究者利用___________技術(shù)篩選出___________(填“牛乳鐵蛋白基因”或“干擾素基因”)成功表達的胚胎進行移植。

Answer 1

【答案】基因工程、早期胚胎培養(yǎng)、核移植、胚胎移植 啟動子 新霉素抗性 干擾素基因成功表達的細胞 胰蛋白酶 全能性 抗原一抗體雜交 干擾素基因

【解析】

本題考查基因工程、細胞工程、胚胎工程，考查對基因工程、細胞工程、胚胎工程操作步驟的理解和識記。據(jù)圖2可知，培育雙轉(zhuǎn)基因奶牛涉及的生物技術(shù)包括轉(zhuǎn)基因技術(shù)、核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)。

（1）培育雙轉(zhuǎn)基因奶牛需要通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)將目的基因轉(zhuǎn)入受體細胞，據(jù)圖可知，除轉(zhuǎn)基因技術(shù)外，獲得雙轉(zhuǎn)基因奶牛還借助于核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)。

（2）構(gòu)建表達載體時啟動子的位置可決定目的基因在何種細胞中表達。據(jù)圖可知，干擾素基因與新霉素抗性基因均位于相同的啟動子和終止子之間，可同時轉(zhuǎn)錄，在翻譯時，核糖體可識別mRNA上IRES序列的對應(yīng)部分，啟動另一種肽鏈的合成，使新霉素抗性基因得到表達，因此在含有新霉素的培養(yǎng)基可生存的細胞干擾素基因也已成功表達。

（3）對牛胎兒成纖維細胞用胰蛋白酶處理，可水解細胞間的膠原纖維，使細胞分散。將成纖維細胞的細胞核移入去核的卵母細胞中，卵母細胞的細胞質(zhì)可誘導(dǎo)已分化的細胞核恢復(fù)分裂、分化，并最終發(fā)育為新個體，實現(xiàn)動物細胞細胞核的全能性。

（4）牛乳鐵蛋白基因在成年牛的乳腺中才能表達，人干擾素基因可在牛全身細胞表達，因此篩選胚胎時可利用抗原一抗體雜交技術(shù)篩選干擾素基因成功表達的胚胎。