Question

9．科學(xué)家利用基因工程和細(xì)胞核移植技術(shù)培育了綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬．其基本流程是：首先從熒光水母中獲取目的基因，然后與有關(guān)載體重組，并將其導(dǎo)入豬胎兒的成纖維細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后再將成纖維細(xì)胞移植入去核的卵母細(xì)胞中，最后培養(yǎng)出轉(zhuǎn)基因克隆豬．請(qǐng)回答有關(guān)問題：
（1）科學(xué)家從熒光水母細(xì)胞中獲取綠色熒光蛋白基因所運(yùn)用的酶稱為限制酶，并用同種的該種酶去作用于運(yùn)載體，才能有利于重組載體的構(gòu)建．
（2）基因工程中，將重組載體導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞常用的方法是顯微注射法．
（3）作為核移植受體細(xì)胞的去核卵母細(xì)胞一般處在MⅡ中（減數(shù)第二次分裂中）期，常通過電脈沖（或電激）（物理方法）進(jìn)行激活，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程．
（4）培養(yǎng)重組細(xì)胞時(shí)，將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類、數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為合成培養(yǎng)基，但通常在培養(yǎng)基中還需要加入適量的血清（或血漿）等天然成分．
（5）重組細(xì)胞培養(yǎng)至一定階段還可通過胚胎分割、胚胎移植的方法，從而最終一次獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因豬．最后這個(gè)過程現(xiàn)階段必須通過胚胎移植才能實(shí)現(xiàn)，其實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移．

Answer 1

分析 1、胚胎分割是指采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，經(jīng)移植獲得同卵雙胚或多胚的技術(shù)．來(lái)自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，胚胎分割可以看做動(dòng)物無(wú)性繁殖或克隆的方法之一．
2、胚胎移植--是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)．胚胎移植簡(jiǎn)單概括為早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移．
3、受體細(xì)胞常選用去核卵（母）細(xì)胞的原因：卵（母）細(xì)胞大，容易操作；卵（母）細(xì)胞質(zhì)多，營(yíng)養(yǎng)豐富；含有促使細(xì)胞全能性表達(dá)的物質(zhì)．

解答 解：（1）限制酶切割DNA片段，獲取綠色熒光蛋白基因．并用同種限制酶去作用于運(yùn)載體，讓它產(chǎn)生與目的基因相同的粘性末端，有利于重組載體的構(gòu)建．
（2）基因工程中，將重組載體導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞常用的方法是顯微注射法．
（3）受體細(xì)胞常選用去核卵（母）細(xì)胞的原因：卵（母）細(xì)胞大，容易操作；卵（母）細(xì)胞質(zhì)多，營(yíng)養(yǎng)豐富；含有促使細(xì)胞全能性表達(dá)的物質(zhì)．選取處在MⅡ中（減數(shù)第二次分裂中）期的去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的，通過電脈沖（或電刺激）進(jìn)行激活，使其完成減數(shù)分裂和發(fā)育進(jìn)程．
（4）培養(yǎng)圖示重組細(xì)胞時(shí)，將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類、數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為合成培養(yǎng)基．動(dòng)物細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．通常在培養(yǎng)基中還需要加入適量的血清（或血漿）等天然成分．
（5）胚胎分割采用機(jī)械方法將早期胚胎切割，經(jīng)移植獲得同卵雙胚或多胚，從而獲得較多基因型相同的轉(zhuǎn)基因豬．圖示重組細(xì)胞培養(yǎng)至桑椹胚或囊胚，可通過胚胎分割、胚胎移植方法，從而一次獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因豬．過程⑧是胚胎移植過程，其實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移．
故答案為：
（1）限制酶     同種 
（2）顯微注射法
（3）MⅡ中（減數(shù)第二次分裂中）   電脈沖（或電激）
（4）血清（或血漿）
（5）胚胎分割、胚胎移植      早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移

點(diǎn)評(píng) 本題著重考查了基因工程、胚胎工程等方面的知識(shí)，意在考查考生能識(shí)記并理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成一定知識(shí)網(wǎng)絡(luò)的能力，并且具有一定的分析能力和理解能力．