Question

【題目】我國科學家培育抗蟲棉的流程如圖所示�；卮鹣铝杏嘘P問題。

（l）基因工程中用到的基本工具酶是____________________。細菌的基因能整合到棉花細胞的DNA上并在棉花細胞中表達的原因是______________________________。

（2）①過程是指____________________，該過程所依據的原理是____________________，常用于調節(jié)該過程的植物激素有________________________________________。

（3）若要檢測Bt毒蛋白基因在棉花細胞中是否完全表達，在分子水平上的檢測方法是_____________________。

（4）為了保持抗蟲性狀，可利用抗蟲棉的體細胞脫分化產生愈傷組織，然后進一步制造人工種子。人工種子的結構包括____________________。

Answer 1

【答案】限制性核酸內切酶（或限制酶）、DNA連接酶 不同生物的DNA結構相似，且生物界共用一套密碼子 植物組織培養(yǎng) 植物細胞具有全能性 生長素、細胞分裂素 抗原——抗體雜交 胚狀體、人造胚乳和人工種皮

【解析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA﹣﹣分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質﹣﹣抗原—﹣抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）基因工程的基本工具是限制性核酸內切酶（簡稱限制酶）、DNA連接酶和基因運載體，其中屬于工具酶的是限制性核酸內切酶和DNA連接酶；生物的DNA分子都由四種脫氧核苷酸構成，具有雙螺旋結構，所以異源DNA片段可以進行連接，并且生物界共用一套密碼子，基因的表達機制相同，所以一種生物的基因可以在另一種生物的細胞中表達。

（2）①過程為植物的組織培養(yǎng)，其依據的原理是植物細胞具有全能性，該過程包括脫分化和再分化兩個階段。誘導脫分化和再分化的植物激素主要是生長素和細胞分裂素，生長素/細胞分裂素的值適中，促進愈傷組織形成；生長素/細胞分裂素的值高，促進根分化，抑制芽形成；生長素/細胞分裂素的值低，促進芽分化，抑制根形成。

（3）如果毒蛋白基因在棉花細胞中完全表達，則棉花細胞中能合成毒蛋白，使棉花植株具有抗蟲性狀，所以在分子水平上，采用抗原—抗體雜交的方法，使用特異的抗體檢測棉花細胞中是否存在毒蛋白，能確認毒蛋白基因在棉花細胞中是否完全表達。

（4）人工種子是用愈傷組織培養(yǎng)成的胚狀體，加入人造胚乳，再用人工種皮包裹而成的。