Question

6．中國經(jīng)濟(jì)的發(fā)展深刻地影響著農(nóng)村生活，過去農(nóng)村大多以農(nóng)作物秸稈作為主要能源用于做飯、取暖等，現(xiàn)在基本上已經(jīng)被電能、天然氣等能源所取代，從而造成一些不必要的能源閑置及浪費(fèi)．其實(shí)農(nóng)作物秸稈是一種廉價(jià)易得的資源，有很大的利用價(jià)值．請回答下列相關(guān)問題：
（1）秸稈的主要成分是纖維素，植物細(xì)胞的細(xì)胞壁也是由該成分構(gòu)成的．
（2）從土壤中分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程如下：
（一）土壤取樣→（二）選擇培養(yǎng)→（三）梯度稀釋→（四）將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基上→（五）挑選菌落．該過程中步驟（二）選擇培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)的特點(diǎn)是以纖維素作為唯一碳源；步驟（五）挑選菌落時(shí)應(yīng)該挑選出現(xiàn)透明圈的菌落．
（3）為了測定細(xì)菌含量，將稀釋度為10⁴的菌液均按0.1mL的用量各接種3個(gè)平板，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，3個(gè)平板上長出的菌落數(shù)分別為42、55、38，則每升菌液的活菌數(shù)約為4.5×10⁹個(gè)．活菌的實(shí)際數(shù)目往往比該方法測得的數(shù)據(jù)多（填“多”“少”或“相等”）．

Answer 1

分析 1、分解纖維素的微生物的分離實(shí)驗(yàn)的原理：
①土壤中存在著大量纖維素分解酶，包括真菌、細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶．纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長．
②在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌．
2、統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法
（1）顯微鏡直接計(jì)數(shù)法
 ①原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)； ③缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌．
（2）間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法）
 ①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌．通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌．
②操作
a、設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性．
b、為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)．
③計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)．

解答 解：（1）秸稈的主要成分是纖維素，植物細(xì)胞的細(xì)胞壁也是由該成分構(gòu)成的．
（2）要從土壤中分離分解纖維素的微生物，應(yīng)該用以纖維素作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基；挑選菌落時(shí)，應(yīng)該挑選出現(xiàn)透明圈的菌落．
（3）為了測定細(xì)菌含量，將稀釋度為10⁴的菌液均按0.1mL的用量各接種3個(gè)平板，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，3個(gè)平板上長出的菌落數(shù)分別為42、55、38，則每升菌液的活菌數(shù)約為$\frac{42+55+38}{3}$×10⁴×1000×$\frac{1}{0.1}$=4.5×10⁹ 個(gè)．當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察的是一個(gè)菌落，因此活菌的實(shí)際數(shù)目往往比該方法測得的數(shù)據(jù)多．
故答案為：
（1）纖維素    細(xì)胞壁
（2）梯度稀釋   以纖維素作為唯一碳源     透明圈
（3）4.5×10⁹     多

點(diǎn)評 本題考查微生物分離和培養(yǎng)，要求考生識記培養(yǎng)基的種類及功能；識記接種微生物常用的兩種方法及計(jì)數(shù)微生物常用的方法，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．