Question

【題目】科學(xué)家利用土壤農(nóng)桿菌把編碼霍亂毒素的無毒性β鏈的基因轉(zhuǎn)移到苜蓿細(xì)胞，再將其培養(yǎng)成幼苗，食用這種苜蓿苗后，霍亂毒素β鏈很快被喉、腸胃等部位的分泌性粘液細(xì)胞吸收，刺激特異性抗體的大量產(chǎn)生，使機(jī)體獲得對(duì)霍亂的免疫。其具體過程如下：

（1）構(gòu)建重組DNA分子常用的工具酶是 ，基因工程中構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是 。

（2）圖中過程②采用的方法是 ，Ti質(zhì)粒上有一個(gè)tms片段能促進(jìn)生長(zhǎng)素的大量合成，在對(duì)Ti質(zhì)粒改造時(shí)要將該片段去除，其原因是 。

（3）該實(shí)驗(yàn)中將農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入苜蓿細(xì)胞的原生質(zhì)體后，需再生細(xì)胞壁，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)原生質(zhì)體是否再生出細(xì)胞壁的方法是 。

（4）含目的基因的苜蓿細(xì)胞通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)，經(jīng)過 、 兩個(gè)重要階段能發(fā)育成幼苗。

Answer 1

【答案】（1）限制酶和DNA連接酶使目的基因在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定地復(fù)制并表達(dá)

（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法防止植物（苜蓿）體內(nèi)生長(zhǎng)素濃度過高而抑制植物（苜蓿）生長(zhǎng)

（3）將細(xì)胞置于高滲溶液中，觀察是否發(fā)生質(zhì)壁分離

（4）脫分化再分化

【解析】

試題分析：（1）基因工程中常用的工具酶有限制酶和DNA連接酶。構(gòu)建基因表達(dá)載體的主要目的是使目的基因在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定地復(fù)制并表達(dá)。

（2）圖中過程②是利用農(nóng)桿菌將重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞，這種方法稱為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。Ti質(zhì)粒上有一個(gè)tms片段能促進(jìn)生長(zhǎng)素的大量合成，如果合成的生長(zhǎng)素濃度過高會(huì)抑制植物（苜蓿）生長(zhǎng)，所以在對(duì)Ti質(zhì)粒改造時(shí)要將該片段去除。

（3）將細(xì)胞置于高滲溶液中，觀察是否發(fā)生質(zhì)壁分離，是實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)原生質(zhì)體是否再生出細(xì)胞壁的常用方法。

（4）植物組織培養(yǎng)技術(shù)包括脫分化和再分化過程。