Question

【題目】下圖為基因工程操作步驟示意圖。請回答下列問題：

（1）從基因文庫中提取的目的基因通過_____________技術進行擴增。與細胞內同類酶相比，該技術所利用的DNA聚合酶所具有的特點是____________。

（2）在過程①中，需______________酶將已切開的載體DNA與目的基因結合成基因表達載體。載體DNA上必須要有標記基因，標記基因的作用是_______________________。過程②中若選用的受體細胞為大腸桿菌，一般需用Ca2+進行處理，其目的是_______________________。

（3）若將病毒外殼蛋白基因導入酵母菌或哺乳動物細胞中，使之表達出病毒外殼蛋白（抗原），經純化后而制得的疫苗可用于生產基因工程疫苗，接種基因工程疫苗比接種滅活減毒的病毒疫苗更安全，從疫苗的結構組成來看，其原因是_______________________________________________。

Answer 1

【答案】PCR 耐高溫 DNA連接 鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來（或篩選出含目的基因的受體細胞） 使大腸桿菌處于容易吸收周圍環(huán)境DNA分子的感受態(tài) 基因工程疫苗僅具有病毒外殼蛋白，不具有遺傳物質，不會出現(xiàn)病毒增殖和感染

【解析】

基因工程的基本步驟：1、目的基因的獲��；2、基因表達載體的構建；3、將目的基因導入受體細胞；4、目的基因的檢測與鑒定。

（1）通常使用PCR技術對目的基因進行擴增。在PCR技術中應用的關鍵酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶，其特點是耐高溫。

（2）DNA連接酶能將已切開的載體DNA與目的基因連接起來形成磷酸二酯鍵；標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來；由于未處理的大腸桿菌吸收周圍環(huán)境DNA分子的能力較弱，所以常用Ca2+處理大腸桿菌，使大腸桿菌處于容易吸收周圍環(huán)境DNA分子的感受態(tài)。

（3）基因工程疫苗不含有遺傳物質，可以引發(fā)機體發(fā)生特異性免疫反應形成抗體和記憶細胞，但由于其不增殖和感染人體，比常規(guī)疫苗安全性更高。