Question

15．“創(chuàng)衛(wèi)”是創(chuàng)建衛(wèi)生城市的簡稱．“衛(wèi)生城市”是一個城市綜合功能和文明程度的重要標(biāo)志．某同學(xué)欲利用所學(xué)習(xí)的微生物培養(yǎng)知識，通過實驗證明痰液中含有細(xì)菌，來倡導(dǎo)同學(xué)們不要隨地吐痰，為“創(chuàng)衛(wèi)”添一份力．請回答下列問題：
（1）欲培養(yǎng)細(xì)菌必須先制備可供細(xì)菌生長的培養(yǎng)基．實驗室中常用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基來培養(yǎng)微生物，該培養(yǎng)基的組成成分包括牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂、H₂O等；該培養(yǎng)基中微生物所需的氮源來自牛肉膏、蛋白胨，制備該培養(yǎng)基的步驟是：計算-稱量-溶化-滅菌-倒平板，其中滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌法；培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右才能倒平板，等平板冷凝后，還需要將平板倒置，主要目的是防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染
（2）為了使實驗更有說服力，某同學(xué)設(shè)置空白對照組和若干實驗組，其中對照組的作用是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響．若在某次調(diào)查中，某一實驗組平板上的平均菌落數(shù)為39個，而空白對照組的平板上出現(xiàn)19個菌落，這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象．
（3）某同學(xué)利用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中細(xì)菌的數(shù)目，統(tǒng)計結(jié)果往往比實際細(xì)菌的數(shù)目要低，主要原因是：當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成
①各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽；
②不同培養(yǎng)基還要滿足不同微生物對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．
2、配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的注意事項
①倒平板的溫 度一般50℃左右適宜，溫度過高會燙手，過低培養(yǎng)基又會凝固；
②平板需倒置，這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染．

解答 解：（1）配制固體培養(yǎng)基時，需加入凝固劑，常用的凝固劑是瓊脂．對培養(yǎng)基滅菌常用的方法是高壓
蒸汽滅菌法．倒平板的溫度通常要冷卻到50℃左右．由丁平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，應(yīng)將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染．
（2）設(shè)置對照的主要目的是排除實驗組中非測試兇素對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度．在操作正 確的情況下，空白對照組中不應(yīng)出現(xiàn)菌落，若出現(xiàn)菌落，則說明操作過程中存在微生物污染．
（3）由于稀釋涂布平板法統(tǒng)計的是菌落數(shù)，以此來代表細(xì)菌數(shù)，因此只能統(tǒng)計活菌數(shù)，不能統(tǒng)計死菌；又因為 當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此此方法統(tǒng)計的結(jié)果比實際數(shù)要�。�
故答案為：
（1）瓊脂    牛肉膏、蛋白胨    高壓蒸汽滅菌法     50     防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染
（2）排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響（答案合理即可給分）  污染
（3）當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落

點評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記培養(yǎng)基的成分、種類及功能；掌握接種微生物常用的兩種方法，尤其是劃線分離操作中需要注意的有關(guān)問題，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．