Question

5．某研究者用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價（能檢測出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)），結(jié)果如圖所示．
若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞（染色體數(shù)目40條），并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞（染色體數(shù)目60條）按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞．
回答下列問題：
（1）制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時，所用免疫小鼠的穩(wěn)中有降清抗體效價需達(dá)到16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過四次免疫后才能有符合要求的．達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是Y小鼠，理由是Y小鼠的血清抗體效價最高．
（2）細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%．
（3）雜交瘤細(xì)胞中有1個細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是200條．
（4）未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是①B淋巴細(xì)胞高度分化，不能惡性增殖；②不可能渡過原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)過程中的兩次危機(jī)．

Answer 1

分析 據(jù)圖分析，在第四次沒有過程中出現(xiàn)了Y血清抗體均達(dá)到16000以上；在第五次中，Y的效價最大，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞；B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞形成的雜交細(xì)胞有三種：B淋巴細(xì)胞自身融合的細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞．融合形成的雜交瘤細(xì)胞，具有2個親本的染色體，故染色體為100條．

解答 解：（1）據(jù)圖分析，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價均達(dá)到16000以上，小鼠Y的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體效價最高，最適用于制備單克隆抗體．
（2）融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外，還有骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的自身融合產(chǎn)物，由于細(xì)胞膜具有流動性，且誘導(dǎo)之后的細(xì)胞融合不具有特異性，故體系中會出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞．
（3）雜交瘤細(xì)胞形成后，由于核膜具有流動性，故小鼠的免疫B淋巴細(xì)胞核與其骨骼瘤細(xì)胞核會融合形成一個雜交的細(xì)胞核．小鼠的B淋巴細(xì)胞（染色體數(shù)目40條）和骨髓瘤細(xì)胞（染色體數(shù)目60條）融合后，染色體可達(dá)100條，在有絲分裂后期染色體數(shù)目臨時加倍為200條．
（4）未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后，仍然不是能惡性增殖的細(xì)胞，同時B淋巴細(xì)胞不可能渡過原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)過程中的兩次危機(jī)達(dá)到細(xì)胞系水平．
故答案為：
（1）四  Y  Y小鼠的血清抗體效價最高
（2）B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞    細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%
（3）1 200
（4）①B淋巴細(xì)胞高度分化，不能惡性增殖
②不可能渡過原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)過程中的兩次危機(jī)

點(diǎn)評 本題考查單克隆抗體制備的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生的識圖和判斷能力，屬于中檔題．