Question

【題目】圖示某實(shí)驗(yàn)小組從土壤中篩選能高效降解地溝油細(xì)菌的過(guò)程。請(qǐng)回答：

（1）土壤樣品應(yīng)該采集自_______________的土壤中。

（2）圖中的細(xì)菌培養(yǎng)基中主要物質(zhì)有水、無(wú)機(jī)鹽、___________、___________，從培養(yǎng)基的物理狀態(tài)分析，在該培養(yǎng)基的配制過(guò)程中，還需要加入_____________。

（3）圖中的選擇培養(yǎng)基應(yīng)以______________為唯一碳源。在鑒別培養(yǎng)基中可加入適量的________________（試劑）于平板中的菌落周圍，洗去浮色后，如果菌落周圍的現(xiàn)象是________________，則說(shuō)明此菌株能夠降解地溝油中的脂肪。

（4）若使用稀釋涂布平板法對(duì)菌液中細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，需先將菌液進(jìn)行_______________，然后將不同濃度的菌液用____________涂布到固體培養(yǎng)基表面，培養(yǎng)后計(jì)數(shù)。采用這種計(jì)數(shù)方法統(tǒng)計(jì)到的細(xì)菌數(shù)目往往比實(shí)際數(shù)目______，原因是________________。為了排除________________，需設(shè)置接種等量無(wú)菌水的培養(yǎng)基作為空白對(duì)照。

Answer 1

【答案】被地溝油污染 碳源 氮源 瓊脂 地溝油 蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ 出現(xiàn)透明圈 （一系列）梯度稀釋 涂布器 少 兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響

【解析】

1、實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選的原理：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)、溫度。pH等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。

2、微生物常見(jiàn)的接種的方法

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。（2）常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。

（1）實(shí)驗(yàn)的目的是從土壤中篩選能高效降解地溝油細(xì)菌，因此土壤樣品應(yīng)該采集自被地溝油污染的土壤中。

（2）圖中的細(xì)菌培養(yǎng)基中主要物質(zhì)有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源。配置固體培養(yǎng)基還需要加入瓊脂。

（3）實(shí)驗(yàn)的目的是從土壤中篩選能高效降解地溝油細(xì)菌，因此該選擇培養(yǎng)基應(yīng)以地溝油為唯一碳源。在鑒別培養(yǎng)基中可加入適量的蘇丹Ⅲ或蘇丹IV于平板中的菌落周圍，洗去浮色后，如果菌落周圍的現(xiàn)象是出現(xiàn)透明圈，則說(shuō)明此菌株能夠降解地溝油中的脂肪。

（4）若使用稀釋涂布平板法對(duì)菌液中細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，需先將菌液進(jìn)行梯度稀釋，然后將不同濃度的菌液用涂布器涂布到固體培養(yǎng)基表面，培養(yǎng)后計(jì)數(shù)。采用這種計(jì)數(shù)方法統(tǒng)計(jì)到的細(xì)菌數(shù)目往往比實(shí)際數(shù)目少，原因是兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。為了排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，需設(shè)置接種等量無(wú)菌水的培養(yǎng)基作為空白對(duì)照。