21．(1)全能性　　 從早期胚胎(囊胚內細胞團)中分離；從胎兒的原始性腺中分離：通過核移植技術培育得到(任答一例) 　(2)①x酶蛋白的功能分析；　 x酶蛋白的三維結構預測和設計；x酶多肽的氨基酸序列設計；　 x酶基因的改造。(2分)　　 �、趦煞N引物、耐熱的DNA聚合酶(Taq DNA聚合酶) (2分)　 　(3)限制酶切割　 　(4)①早期胚胎培養(yǎng)技術和胚胎移植技術(2分)　　 ②提取蛋白質，用相應的抗體進行抗原一抗體雜交。

21．(lO分) 2007年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎授予在“基因靶向”技術方面作出突出貢獻的三位科學家�！盎�因靶向”技術，指的是應用DNA同源重組原理，通過一定的載體，用設計好的目的基因替代靶基因，從而達到使靶基因功能喪失的目的。借助這一技術，科學家可以用小鼠進行實驗，使其體內的某項特定基因喪失功能，以幫助人們找到治療疾病的有效方法。下面是該實驗的基本過程，請回答有關問題。

(1)獲得胚胎干細胞(ES細胞)。實驗一般采用ES細胞作為目的基因的受體細胞，這是因為ES細胞具有發(fā)育的______________。舉出一例獲取Es細胞的常用方法：　　　　　　　　　 。

　(2)獲取目的基因：

　①目的基因是靶基因的同源片段。經(jīng)過修飾使靶基因的功能改變或喪失，就可獲得目的基因。如果要獲得活性降低了的x酶蛋白的目的基因，可以采用蛋白質工程技術，請簡述其過程。

②為了提高實驗成功率，需要通過PCR技術獲得目的基因的大量拷貝。與體內DNA復制相比，PCR反應體系需加入哪兩種特別的物質?　　　　　　　　　　　　　　　　　

(3)構建基因表達載體。質粒是具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀DNA，它所具有的一至多個______

　位點，使目的基因插入其中成為可能，因此常被選作運載體。

(4)將基因表達載體導入ES細胞，從中篩選出成功發(fā)生了同源重組的ES細胞，然后培育出小鼠。

　 ①由ES細胞培育出小鼠的過程中，需要采用哪些技術手段?　　　　　　　　　　　 　

②通過檢測目的基因是否表達出蛋白質產(chǎn)品，可以確定該小鼠體內是否成功發(fā)生了基因的同源重組。請簡述這種檢測方法。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

20．(10分)(1)物質循環(huán)再生原理、物種多樣性原理、系統(tǒng)學和工程學原理(3分)

(2) 沼氣　　 整體性原理　 (3)稻田放養(yǎng)魚和蛙后，浮游動物、底棲動物、水生昆蟲、部分雜草等就成了魚蛙的餌料，從而把這些將要損失的資源充分利用起來。(2分) 另外，魚和蛙糞便及排泄物又可以作為水稻的肥料，魚和蛙呼吸排出的CO2是水稻進行光合作用的碳源。(2分)　 (注：由于①稻田中雜草和水稻構成競爭，雜草占用了營養(yǎng)和日光能；②大量浮游生物及其它水生生物會隨稻田排水流失；③一些水生昆蟲羽化后會飛走，也直接或間接造成養(yǎng)分和日光能的損失；④一些水稻害蟲會使水稻大量減產(chǎn)，水稻中的物質和能量又會隨這些害蟲流失或羽化而離開水稻生態(tài)系統(tǒng))。

(4)①土壤養(yǎng)分增加 ②水稻害蟲量下降 ③田間雜草量下降 ④浮游生物量下降(任答對一項)

20．(10分)甲、乙兩圖分別表示“稻-魚-蛙”共生農業(yè)生態(tài)系統(tǒng)和普通稻田生態(tài)系統(tǒng)的物質能量轉化情況。請據(jù)圖回答：

(1)甲系統(tǒng)遵循的生態(tài)工程的基本原理有　　　　　　 、　　　　　　 、　　　　　　 。

(2)為更好地達到物質利用的良性循環(huán)，緩解農村“三料”的缺乏問題，對甲生態(tài)系統(tǒng)進行改進，可增加　　　　　　　　　 工程，在某些貧困地區(qū)，這一工程充分考慮了如何把生態(tài)與經(jīng)濟結合起來，一定程度解決了農民的生活問題，它所遵循的生態(tài)工程基本原理是　　　　　　　　　　　　 。

(3)相對乙系統(tǒng)而言，魚和蛙在甲生態(tài)系統(tǒng)的物質循環(huán)和能量流動中所起的積極作用是什么？

(4)試舉一例說明“稻-魚-蛙”共生生態(tài)系統(tǒng)的優(yōu)點。

19.(8分)(1) 分化程度低、分裂能力強 (2)動物細胞培養(yǎng)　 無菌、無毒　　 O₂、 CO₂

(3)10代以內的細胞一般能保持正常的二倍體核型　　　 (4)為使核移植的胚胎或動物的遺傳物質全部來自有重要價值的動物提供的體細胞　　　 (5)25　 (6)在世界范圍內使胚胎移植不受時空限制；建立胚胎庫，保存品種資源和瀕危物種等

19.(8分)廣西水牛研究所科研人員利用克隆胚胎冷凍技術，使一頭雜交母水牛順利產(chǎn)下一頭經(jīng)冷凍胚胎移植的體細胞克隆雌性水牛犢，取名“盼盼”。它的出生經(jīng)歷了一個嚴密復雜的科學操作過程(如下圖所示)：

(1)實驗所用的耳纖維細胞取自于1日齡的河流型摩拉水牛，原因是此時獲取的細胞　 　　　。

(2)①④過程主要采取　　 　　　　　　技術才能獲得細胞群或囊胚，一般來說，動物細胞培養(yǎng)需要　 　　　　　　的環(huán)境、與體內基本相同的營養(yǎng)成分、適宜的溫度和PH及細胞培養(yǎng)所需的主要氣體　 　　　　等。

(3)用于核移植的供體細胞一般都選用10代以內的細胞，這是因為　 　　　　　　　　　　。

(4)在體細胞的細胞核移植到受體卵母細胞之前，必須先去掉受體卵母細胞核的原因是　　　 。

(5)當克隆�！芭闻巍毙猿墒旌�，其進行減數(shù)分裂的初級卵母細胞內可以形成　 　　　個四分體。

(6)根據(jù)項目專家介紹，水�？寺∨咛ダ鋬黾夹g的研究成功，有利于水�？寺〖夹g的推廣應用，舉例說明其重要意義：　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

18.(1)感染禽流感病毒的動物或人　 　聚乙二醇(PEG)或滅活的病毒　　 (2) 3　

既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體　 　雜交瘤細胞　 (3)小鼠體內培養(yǎng)和體外培養(yǎng)基培養(yǎng)

(4)禽流感病毒的RNA

18.(7分) 09年4月25號，墨西哥爆發(fā)了大規(guī)模的豬流感疫情。目前，科學家們已經(jīng)分離出了甲型H₁N₁病毒(集豬流感病毒，人流感病毒，禽流感病毒的RNA混合體)。下圖是制備用于預防和治療禽流感單克隆抗體的過程，分析回答：

(1)若A細胞是小鼠骨髓瘤細胞，則B細胞是取自 　　　　　　　　　　　體內的B淋巴細胞，促進d過程的常用誘導劑是 　　　　　　　　　　　　　　。

(2)假設僅考慮某兩個細胞的融合，則可形成　　 種類型的C細胞，因此需用　　　　　　　　　 培養(yǎng)基篩選出具有　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 特點的D細胞用于培養(yǎng)。D細胞的名稱是　　　　　　　 　。

(3)D細胞的培養(yǎng)方式有　　　　　　　　 。

(4)目前注射禽流感疫苗是預防禽流感的一種措施。我們已經(jīng)知道，決定禽流感病毒在人體細胞中增殖變化的物質是　　　　　　　　　　　　 。

5、生態(tài)工程的原理和實例--五大生態(tài)原理及其應用實例分析

4、基因生物的安全性問題、生物武器對人類的威脅、生物技術中的倫理問題。