Question

胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）介導(dǎo)法（轉(zhuǎn)基因動(dòng)物培育的途徑之一），即將外源基因?qū)�入胚胎干�?xì)胞，然后將轉(zhuǎn)基因的胚胎干細(xì)胞注射到受體動(dòng)物胚胎，參與受體動(dòng)物胚胎的構(gòu)成，形成嵌合體．如圖1是實(shí)驗(yàn)過程示意圖，請(qǐng)分析回答下列問題：

（1）體外培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞需要在無菌，溫度、pH適宜，營(yíng)養(yǎng)充足條件下進(jìn)行，由于人們對(duì)細(xì)胞所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還沒有搞清楚，因此在培養(yǎng)ES細(xì)胞時(shí)需加入

 

．
（2）圖1中①過程常用的方法是

 

．圖中②表示導(dǎo)入

 

時(shí)期的胚胎．生成嵌合體小鼠④．小鼠④與通過體外受精技術(shù)培養(yǎng)得到的小鼠“試管鼠”相比，最主要的區(qū)別是

 

．
（3）已知BamHⅠ和BglⅡ兩種限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列及切割點(diǎn)如圖2所示，用這兩種酶和DNA連接酶對(duì)一段含有多個(gè)BamHⅠ和BglⅡ識(shí)別序列的外源基因進(jìn)行反復(fù)的切割和連接操作，若干循環(huán)后

 

序列明顯增多，其原因是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過程,基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析圖1：圖1是胚胎干細(xì)胞介導(dǎo)法培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的流程，其中①表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞；②表示將轉(zhuǎn)基因的胚胎干細(xì)胞注射到受體動(dòng)物胚胎；③表示胚胎移植過程；④表示形成嵌合體．
分析圖2：圖2是BamHⅠ和BglⅡ兩種限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列及切割點(diǎn)．

解答： 解：（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要在無菌，溫度、pH適宜，營(yíng)養(yǎng)充足條件下進(jìn)行，由于人們對(duì)細(xì)胞所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還沒有搞清楚，因此在培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)還需加入適量的動(dòng)物血清、血漿等天然成分．
（2）圖1中①表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞的過程，當(dāng)受體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，常采用顯微注射法．圖中②表示導(dǎo)入囊胚時(shí)期的胚胎．④為嵌合體小鼠，與通過體外受精技術(shù)培養(yǎng)得到的小鼠“試管鼠”相比，嵌合體小鼠中具有遺傳物質(zhì)組成不同的兩種細(xì)胞，而試管鼠細(xì)胞的遺傳物質(zhì)都相同．
（3）一種限制酶只能識(shí)別并切割一種特定的核苷酸序列，BamHⅠ和BglⅡ兩種限制酶的識(shí)別序列不同，但兩者切割后形成的黏性末端相同，用DNA連接酶可將兩者切割后產(chǎn)生的黏性末端連接起來．因此用這兩種酶和DNA連接酶對(duì)一段含有多個(gè)BamHⅠ和BglⅡ識(shí)別序列的外源基因進(jìn)行反復(fù)的切割和連接操作，若干循環(huán)后，明顯增多的序列為．
故答案為：
（1）適量的動(dòng)物血清
（2）顯微注射法    囊胚   嵌合體小鼠中具有遺傳物質(zhì)組成不同的兩種細(xì)胞，而試管鼠細(xì)胞的遺傳物質(zhì)都相同
（3）   一種限制酶只能識(shí)別并切割一種特定的核苷酸序列

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合胚胎干細(xì)胞介導(dǎo)法培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的流程圖，考查基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎工程等知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作步驟；識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程及條件；識(shí)記胚胎工程的相關(guān)技術(shù)，能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．