Question

[生物--選修3：現(xiàn)代生物科技專題]
請根據(jù)以下資料回答問題：
（l）我國生物學(xué)家運用現(xiàn)代生物技術(shù)培育出了轉(zhuǎn)基因絨山羊，其過程如圖1所示；

①該基因工程的核心步驟是將

 

基因與載體重組構(gòu)建基因表達載體．
②若使用的載休質(zhì)粒是雙鏈閉合環(huán)狀的DNA分子，用兩種識別序列不同的限制酶M和N切割如圖2，通過凝膠電泳分離分析得下表；

使用限制酶	酶切結(jié)果（單位：kb）
酶M	1.0、5.0、10.0
酶M+酶N	1.0、2.0、3.0、4.0、5.0

則在該質(zhì)粒中，M酶與N酶的切割位點分別有

 

個和

 

個．分別由M酶與N酶切出的能相互粘連的末端在酶的作用下相互連接，連接后的序列

 

（填“能”或“不能”）用M酶、N酶進行切割．
③胚胎于細(xì)胞（ES）可由囊胚的

 

分離培養(yǎng)獲得，經(jīng)擴大培養(yǎng)誘導(dǎo)分化為早期胚胎，隨后即可植入經(jīng)

 

處理的代孕母羊體內(nèi)，
（2）某H蛋白是一種抗原蛋白，該蛋白也是一種跨膜蛋白，其結(jié)構(gòu)如圖3所示（抗原特性由胞外區(qū)決定）：
①制備免疫小鼠用的H蛋白（抗原）時，應(yīng)構(gòu)建

 

區(qū)基因，轉(zhuǎn)入原核細(xì)胞表達并提純．
②B淋巴細(xì)胞成熟于

 

（填“器官名稱”）中．若要制備抗H蛋白單克隆抗體，所培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞是由骨髓瘤細(xì)胞和接受過

 

 刺激的B淋巴細(xì)胞的融合而成的．
（3）上述轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系的形成以及雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)所采用的現(xiàn)代生物技術(shù)手殷是

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù),胚胎干細(xì)胞的來源及分化

專題：

分析：分析圖1：圖1培育出轉(zhuǎn)基因絨山羊采用了基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)技術(shù)．
分析圖2：酶M和酶N的識別序列不同，但兩者切割后形成的黏性末端相同，即兩者的末端可相互連接．
分析表格：質(zhì)粒是環(huán)狀DNA分子，酶M將質(zhì)粒切割成三個DNA分子片段，所以酶M的切割位點有3個．酶M和酶N共切割成5個片段，所以酶N的切割位點是2個．

解答： 解：（1）①由圖可知，目的基因是IGF-1，而基因工程的核心步驟就是將目的基因（IGF-1）與載體重組構(gòu)建基因表達載體．
②由以上分析可知，M酶的切割位點是3個，M酶的切割位點是2個．由圖可知，M酶與N酶切出的能相互粘連的末端在酶的作用下相互連接形成或，連接后的堿基序列與酶M或酶N的切割位點都不相同，因此不能M酶或N酶切割．
③胚胎干細(xì)胞可由囊胚的內(nèi)細(xì)胞團分離培養(yǎng)獲得，經(jīng)擴大培養(yǎng)誘導(dǎo)分化為早期胚胎，隨后即可植入經(jīng)同期發(fā)情處理的代孕母羊體內(nèi)．
（2）①H蛋白是一種抗原蛋白，也是一種跨膜蛋白，且抗原特性由胞外區(qū)決定，因此制備免疫小鼠用的H蛋白（抗原）時，應(yīng)構(gòu)建胞外區(qū)基因，轉(zhuǎn)入原核細(xì)胞表達并提純．
②B淋巴細(xì)胞成熟于骨髓中．若要制備抗H蛋白單克隆抗體，所培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞是由骨髓瘤細(xì)胞和接受過H蛋白刺激的B淋巴細(xì)胞的融合而成的．
（3）上述轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系的形成以及雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)所采用的現(xiàn)代生物技術(shù)手殷是動物細(xì)胞培養(yǎng)．
故答案為：
（1）①IGF-1    ②3    2    不能    ③內(nèi)細(xì)胞團   同期發(fā)情
（2）①胞外    ②骨髓     H蛋白
（3）動物細(xì)胞培養(yǎng)

點評：本題結(jié)合圖表，考查基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合圖中和表現(xiàn)信息準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．