Question

2011年11月，武漢大學(xué)的科學(xué)家將人的血清白蛋白基因?qū)�入水稻體內(nèi)合成了人的血清白蛋白，這種蛋白質(zhì)的生理活性和人體自然產(chǎn)生的這類物質(zhì)是完全一致的．結(jié)合圖示回答轉(zhuǎn)基因水稻培育過程的相關(guān)問題．

（1）限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)分別是-C^↓AATTG-和-G^↓AATTC-．為保證重組質(zhì)粒表達(dá)載體的準(zhǔn)確構(gòu)建，用

 

切割質(zhì)粒，用

 

切割含目的基因的DNA分子，用

 

連接目的基因和質(zhì)粒．
（2）②過程將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法稱為

 

．
（3）③經(jīng)歷的生理過程主要有

 

和

 

兩個(gè)階段．培育出轉(zhuǎn)基因水稻完整個(gè)體所依據(jù)的生物學(xué)原理是

 

．
（4）基因工程的最后步驟是目的基因的檢測與鑒定，在此步驟可對(duì)培育的植株進(jìn)行分子水平的檢測，可檢測的物質(zhì)有

 

、

 

、

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析題圖：圖示為轉(zhuǎn)基因水稻培育過程圖，其中①為基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程需要限制酶和DNA連接酶；②表示將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞；③表示采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將水稻細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因水稻．

解答： 解：（1）由圖可知，目的基因兩側(cè)都是限制酶EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，因此應(yīng)選用限制酶EcoRⅠ切割含有目的基因的外源DNA分子；質(zhì)粒中含有限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，但EcoRⅠ的切割位點(diǎn)位于標(biāo)記基因中，用其切割會(huì)破壞標(biāo)記，因此為保證重組質(zhì)粒表達(dá)載體的準(zhǔn)確構(gòu)建，應(yīng)選用限制酶MunⅠ切割質(zhì)粒，再用DNA連接酶連接目的基因和質(zhì)粒形成重組質(zhì)粒．
（2）②是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程，當(dāng)受體細(xì)胞是植物細(xì)胞時(shí)，常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（3）③是將受體細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株的過程，該過程需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其原理是細(xì)胞的全能性．植物組織培養(yǎng)包括脫分化和再分化兩個(gè)階段．
（4）基因工程的最后步驟是目的基因的檢測與鑒定，在此步驟可對(duì)培育的植株進(jìn)行分子水平的檢測，可采用DNA分子雜交技術(shù)檢測受體細(xì)胞受否含有人血清白蛋白基因，用分子雜交技術(shù)檢測人血清白蛋白基因是否轉(zhuǎn)錄出的mRNA，用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測人血清白蛋白基因是否翻譯形成血清白蛋白．
故答案為：
（1）限制酶MunⅠ限制酶EcoRⅠDNA連接酶
（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
（3）脫分化　再分化　細(xì)胞的全能性
（4）人血清白蛋白基因　人血清白蛋白基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA　人血清白蛋白

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因水稻的培育過程圖，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、工具、操作步驟及應(yīng)用，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱，并能根據(jù)圖中信息選擇合理的限制酶；識(shí)記植物組織培養(yǎng)過程及原理，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)答題．