Question

【題目】（一）某村莊有一條小溪，近幾年由于上游幾家乳膠廠不斷向其中排放廢水，小溪變得不再清澈。某同學想測定該溪水中的細菌含量情況�；卮鹣铝袉栴}：

（1）先根據所學知識制備LB培養(yǎng)基。制備該培養(yǎng)基的步驟是：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板，下列關于制備LB培養(yǎng)基的敘述，錯誤的是____

A.培養(yǎng)基應先調pH再進行滅菌

B.培養(yǎng)基應先滅菌再分裝到培養(yǎng)皿

C.溶化瓊脂時不能使培養(yǎng)基溢出或燒焦

D.滅菌時一般用高壓蒸汽滅菌鍋在121℃，500g/cm2壓力下滅菌15分鐘

（2）該同學利用上述制備的培養(yǎng)基來檢測水樣中的細菌數量，他所選擇的分離方法應是_____；該同學在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是____。接種在超凈工作臺上進行，工作臺上實驗前一段時間需打開，實驗中需關閉的是______（A.酒精燈 B.照明燈 C.紫外線 D.過濾風）

（3）值得注意的是，他所選擇的這種方法統(tǒng)計的結果往往比實際細菌的數目要低，這是因為①______②_______（不考慮實驗操作原因引起的細菌數目的變化）

（4）該同學欲將所分離出的某種細菌臨時保藏，應接種到試管的______培養(yǎng)基上，等菌落長成后，放入冰箱低溫保藏。

（二）回答有關胚胎工程的問題。

（1）“二娃”政策實施后，一些高齡夫婦選擇“試管嬰兒”技術孕育二胎：要使精子和卵細胞在體外成功融合，首先須采集到成熟的卵細胞，最常用的方法是卵巢經過_______處理后，使用超聲監(jiān)視器確定卵泡的位置，插入穿刺針吸取卵泡液，取出_______，在體外進行人工培養(yǎng)，促進其成熟。同時對于男方提供的精子，須經系列處理與培養(yǎng)，以達到_______狀態(tài)。受精卵形成后，經人工培養(yǎng)至_______階段，借助胚胎移植技術回輸至女方體內，經過自然孕育，即得試管嬰兒。

（2）胚胎干細胞研究發(fā)展前景誘人，它具有發(fā)育全能性和二倍體核型。培養(yǎng)胚胎干細胞的培養(yǎng)基中，必須加入胰島素、葡萄糖、_______等成分。并且要將干細胞接種在飼養(yǎng)層上，用于飼養(yǎng)層的細胞一般是_______。

（3）下列有關胚胎移植的說法錯誤的是_______

A．供體與受體是同一物種的雌性

B．受體與供體保持相同的的生理狀態(tài)

C．供體胚胎與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系

D.多胚胎移植在提高妊娠率的同時，常可獲得性狀完全相同的孩子

Answer 1

【答案】 D （稀釋）涂布分離法 檢查平板滅菌是否徹底 C ①該方法只能統(tǒng)計樣品中活菌的數目，死菌無法統(tǒng)計 ②當兩或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落 斜面 超數排卵 卵母細胞 【答題空10】獲能 早期囊胚 動物血清 胚胎成纖維細胞 D

【解析】本題考查微生物培養(yǎng)與應用、胚胎移植等知識，要求考生理解相關知識的要點，把握知識間內在聯(lián)系，形成知識網絡結構的能力。

（一）（1）要想測定該溪水中的細菌含量情況，需先根據所學知識制備LB培養(yǎng)基，制備該培養(yǎng)基的步驟是：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板；制備LB培養(yǎng)基時，培養(yǎng)基應先調pH再進行滅菌，A正確；培養(yǎng)基應先滅菌再分裝到培養(yǎng)皿，B正確；溶化瓊脂時不能使培養(yǎng)基溢出或燒焦，C正確；滅菌時一般用高壓蒸汽滅菌鍋在121℃，100kPa壓力下維持15-30分鐘，D錯誤。

（2）用上述制備的培養(yǎng)基來檢測水樣中的細菌數量時，選擇的分離方法應是稀釋涂布分離法；在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是檢查平板滅菌是否徹底。接種在超凈工作臺上進行，工作臺上實驗前一段時間需打開，實驗中需關閉紫外線，以防止對人體造成傷害。

（3）稀釋涂布分離法檢測水樣中的細菌數量時，由于①該方法只能統(tǒng)計樣品中活菌的數目，死菌無法統(tǒng)計，②當兩或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，導致統(tǒng)計的結果往往比實際細菌的數目要低。

（4）臨時保藏菌種時，應將菌種接種到試管的斜面培養(yǎng)基上，等菌落長成后，放入冰箱低溫保藏。

（二）（1）高齡夫婦選擇“試管嬰兒”技術孕育二胎時：要使精子和卵細胞在體外成功融合，首先須采集到成熟的卵細胞，最常用的方法是卵巢經過超數排卵處理后，使用超聲監(jiān)視器確定卵泡的位置，插入穿刺針吸取卵泡液，取出（次級）卵母細胞，在體外進行人工培養(yǎng)，促進其成熟。同時對于男方提供的精子，須經系列處理與培養(yǎng)，以達到獲能狀態(tài)。受精卵形成后，經人工培養(yǎng)至8細胞到早期囊胚階段，借助胚胎移植技術回輸至女方體內，經過自然孕育，即得試管嬰兒。

（2）培養(yǎng)胚胎干細胞的培養(yǎng)基中，必須加入胰島素、葡萄糖、動物血清等成分，并且要將干細胞接種在飼養(yǎng)層上，用于飼養(yǎng)層的細胞一般是胚胎成纖維細胞。

（3）胚胎移植時，供體與受體應該是同一物種的雌性個體，A正確；受體與供體應保持相同的的生理狀態(tài)，B正確；供體胚胎與受體子宮需建立正常的生理和組織聯(lián)系，C正確；多胚胎移植可提高妊娠率的同時，但移植的多個胚胎性別不一定相同，性狀也有差異，D錯誤。