Question

5．某研究小組從牛的瘤胃中采集樣本，進行分解尿素的微生物的分離與計數．實驗基本步驟如圖所示：

請回答：
（1）分解尿素的微生物能合成脲酶（分解尿素的酶），因此，配制培養(yǎng)基時以尿素作為唯一氮源，尿素會被分解成氨（NH₃）使培養(yǎng)基的堿性增強．
（2）配制培養(yǎng)基時，需添加瓊脂，瓊脂起凝固劑作用；培養(yǎng)基中添加酚紅作為指示劑，可使目標菌落的周圍產生紅色環(huán)帶．
（3）本實驗中使用的平板和試管比較多，為避免混淆，最好在使用前就做好標記．例如，在標記培養(yǎng)皿是，應注明培養(yǎng)基種類、培養(yǎng)日期以及平板上培養(yǎng)樣品的稀釋度等．
（4）為成功地從牛的瘤胃中采集到目的菌株，可進行選擇培養(yǎng)以增加目的菌株的濃度，具體地操作方法為將采集的樣本加入到裝有30ml選擇培養(yǎng)基的錐形瓶中，將錐形瓶固定在搖床上，在一定溫度下培養(yǎng)，直至培養(yǎng)液變渾濁．

Answer 1

分析 1、接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞．
2、由于細菌分解在尿素的過程中合成脲酶，脲酶將尿素分解成氨，會使培養(yǎng)基堿性增強，PH升高，所以可以用檢測pH的變化的方法來判斷尿素是否被分解，可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，尿素被分解后產生氨，PH升高，指示劑變紅．

解答 解：（1）分解尿素的微生物含有脲酶，因此，配制培養(yǎng)基時以尿素作為唯一氮源，尿素會被分解成氨（NH₃）使培養(yǎng)基的堿性增強．
（2）配制培養(yǎng)基時，瓊脂起凝固劑作用；培養(yǎng)基中添加酚紅作為指示劑，可使目標菌落的周圍產生紅色環(huán)帶．
（3）本實驗中使用的平板和試管比較多，為避免混淆，最好在使用前就做好標記．例如，在標記培養(yǎng)皿是，應注明培養(yǎng)基種類、培養(yǎng)日期以及平板上培養(yǎng)樣品的稀釋度等．
（4）為成功地從牛的瘤胃中采集到目的菌株，可進行選擇培養(yǎng)以增加目的菌株的濃度，具體地操作方法為將采集的樣本加入到裝有30ml選擇培養(yǎng)基的錐形瓶中，將錐形瓶固定在搖床上，在一定溫度下培養(yǎng)，直至培養(yǎng)液變渾濁．
故答案為：
（1）脲酶（分解尿素的酶）       氨（NH₃）
（2）凝固劑       酚紅
（3）培養(yǎng)基種類 平板上培養(yǎng)樣品的稀釋度
（4）選擇培養(yǎng)  渾濁

點評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關知識，要求考生能夠識記尿素分解菌分離和鑒定的方法，掌握微生物分離與純化的方法，同時具有一定的實驗操作能力．