Question

微生物的培養(yǎng)與鑒定．
Ⅰ．為了檢測飲用水中是否會有某種細(xì)菌，配制如下培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)：
（1）表中培養(yǎng)基可培養(yǎng)的微生物同化作用類型是

 

．
（2）若將青霉素加入培養(yǎng)基中，則該培養(yǎng)基從功能上區(qū)分，應(yīng)屬于

 

培養(yǎng)基，可用于培養(yǎng)

 

等微生物．
（3）表中營養(yǎng)成分共有

 

類．
（4）不論何種培養(yǎng)基，在各種成分都熔化后滅菌前，要進(jìn)行的是

 

．
（5）表中各成分質(zhì)量確定的原則是

 

．
（6）若表中培養(yǎng)基用于菌種鑒定，應(yīng)該增加的成分是

 

．
Ⅱ．某同學(xué)在做微生物實驗時，不小心把圓褐固氮菌和

編號	成分	含量
①	粉狀硫	10g
②	（NH4）2SO4	0.4g
③	K2HPO4	4.0g
④	MgSO4	9.25g
⑤	FeSO4	0.5g
⑥	CaCl2	0.5g
⑦	H2O	100ml

酵母菌混合在一起．請你完成分離得到純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌的實驗步驟，并回答有關(guān)問題：
（7）主要步驟：
①制備兩種培養(yǎng)基：一種是

 

培養(yǎng)基，另一種

 

的培養(yǎng)基．分別分成兩份，依次標(biāo)上A，A′和B，B′，備用．
②分別向A、B培養(yǎng)基中接種

 

．
③接種后，放在恒溫箱中培養(yǎng)3～4天．
④分別從A、B培養(yǎng)基的菌落中挑取生長良好的菌種，接種到A′、B′培養(yǎng)基中．
⑤接種后，把A′、B′培養(yǎng)基放入恒溫箱中培養(yǎng)3～4天．
（8）回答問題：在步驟①②中，為保證無雜菌污染，實驗中應(yīng)采用的主要措施有

 

、

 

、

 

．第④⑤兩個步驟的目的是

 

．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養(yǎng),培養(yǎng)基對微生物的選擇作用

專題：

分析：1、培養(yǎng)基的基本成分：水、無機鹽、碳源、氮源及特殊生長因子；
2、無菌操作，包括滅菌和消毒兩種方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；滅菌的方法有干熱滅菌、灼燒滅菌和高壓蒸汽滅菌；
3、微生物的接種：微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，常用來統(tǒng)計樣品活菌數(shù)目的方法是稀釋涂布平板法．
4、實驗設(shè)計的原則有單一變量原則和對照原則．

解答： 解：Ⅰ、（1）分析表格可知，該培養(yǎng)基沒有有機碳源和氮源，故說明培養(yǎng)的微生物能利用無機碳和氮源，說明此微生物同化作用類型是自養(yǎng)型微生物．
（2）若將青霉素加入培養(yǎng)基中，則該培養(yǎng)基從功能上區(qū)分，應(yīng)屬于選擇培養(yǎng)基，可用于培養(yǎng)酵母菌（真菌、古細(xì)菌、具有抗青霉素基因的細(xì)菌），等微生物．
（3）表中營養(yǎng)成分共有3類，即水、無機鹽、生長因子．
（4）不論何種培養(yǎng)基，在各種成分都熔化后滅菌前，要進(jìn)行的是調(diào)整pH值．
（5）表中各成分質(zhì)量確定的原則是依微生物的生長需要確定．
（6）若表中培養(yǎng)基用于菌種鑒定，該培養(yǎng)基應(yīng)為固體培養(yǎng)基，故應(yīng)該增加的成分是瓊脂．
Ⅱ、（7）要分離得到純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌，要制備兩種培養(yǎng)基：一種是無氮培養(yǎng)基，另一種加青霉素的培養(yǎng)基．分別分成兩份，依次標(biāo)上A，A′和B，B′，備用．分別向A、B培養(yǎng)基中接種混合菌．
（8）為保證無雜菌污染，實驗中應(yīng)采用的主要措施有培養(yǎng)基高壓蒸氣滅菌、接種環(huán)在酒精燈火焰上滅菌、接種過程在酒精燈火焰附近進(jìn)行，第④⑤兩個步驟的目的是獲得純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌．
故答案為：
Ⅰ、（1）自養(yǎng)型微生物
（2）選擇培養(yǎng)基    酵母菌（真菌、古細(xì)菌、具有抗青霉素基因的細(xì)菌）
（3）3
（4）調(diào)整pH值
（5）依微生物的生長需要確定
（6）瓊脂（或凝固劑）
Ⅱ、（7）①無氮　　　加青霉素        ②混合菌
（8）培養(yǎng)基高壓蒸氣滅菌　　　　接種環(huán)在酒精燈火焰上滅菌   接種過程在酒精燈火焰附近進(jìn)行　　　　獲得純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌

點評：本題主要考查微生物實驗室分離及相關(guān)應(yīng)用，意在考查考生對相關(guān)知識的理解，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力．