Question

1．干擾素具有抗病毒、抑制腫瘤及免疫調節(jié)等多種生物活性．將人干擾素基因導人家蠶細胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可提取干擾素用于制藥．
（1）干擾素的產生受細胞內基因的控制，通常處于抑制狀態(tài)．在病毒刺激下，干擾素基因經轉錄、翻譯形成干擾素前體，進一步加工后形成成熟的干擾素，通過胞吐方式分泌到細胞外．
（2）進行轉基因操作前，需用胰蛋白（或膠原蛋白） 酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細胞．
（3）為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的啟動子和終止子之間．
（4）某些干擾素可抑制腫瘤細胞DNA的合成，通過減慢細胞有絲分裂過程抑制腫瘤．還有些干擾素可提高吞噬細胞將抗原呈遞給T淋巴細胞的能力，從而在免疫調節(jié)中發(fā)揮作用．
（5）利用生物反應器培養(yǎng)家蠶細胞時，貼壁生長的細胞會產生接觸抑制．通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放人反應器中，這樣可以擴大細胞貼壁生長的附著面積，增加培養(yǎng)的細胞數量，也有利于空氣交換．

Answer 1

分析 1、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、動物細胞培養(yǎng)過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．

解答 解：（1）基因控制蛋白質合成包括轉錄和翻譯兩個重要過程；干擾素是一類糖蛋白，屬于分泌蛋白，在核糖體上合成，經過內質網、高爾基體加工，最后由細胞膜以胞吐的方式將其分泌到細胞外．
（2）動物細胞培養(yǎng)時，需用用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理動物組織，以便獲得單個細胞．
（3）基因表達載體由啟動子、標記基因、目的基因和終止子組成，其中啟動子是RNA聚合酶識別與結合的部位，終止子是轉錄終止子的部位，因此為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的啟動子和終止子之間．
（4）腫瘤細胞最大的特點是能無限增殖，其增殖方式是有絲分裂，干擾素能抑制DNA的復制來抑制腫瘤，同時提高了吞噬細胞將抗原呈遞給T淋巴細胞的能力，從而在免疫調節(jié)中發(fā)揮作用．
（5）動物細胞培養(yǎng)時，由于貼壁生長的細胞會產生接觸抑制，因此通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放人反應器中，這樣可以擴大細胞貼壁生長的附著面積，增加培養(yǎng)的細胞數量，也有利于空氣交換．
故答案為：
（1）轉錄    胞吐
（2）胰蛋白（或膠原蛋白）
（3）啟動子    終止子
（4）有絲     T淋巴
（5）擴大細胞貼壁生長的附著面積

點評 本題綜合考查基因工程、動物細胞培養(yǎng)和免疫的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中需用注意的細節(jié)問題，了解基因工程技術的應用；識記動物細胞培養(yǎng)的具體過程；識記體液免疫和細胞免疫的具體過程，能結合所學的知識準確答題．