Question

4．目前栽培的主要香蕉品種是三倍體，不結(jié)種子，因此無(wú)性繁殖成了主要種植方式．香蕉生產(chǎn)最容易遭受香蕉束頂病毒（BBTV）侵染，影響了全世界許多地區(qū)的香蕉產(chǎn)業(yè)．為提高其產(chǎn)量，某生物小組利用基因工程技術(shù)培育抗BBTV香蕉．
（1）闡述三倍體香蕉不結(jié)種子的原因減數(shù)分裂過(guò)程中發(fā)生聯(lián)會(huì)紊亂，不能形成正常生殖細(xì)胞．
（2）為獲取抗BBTV基因，可從含有該抗病基因的細(xì)胞中提取對(duì)應(yīng)RNA，構(gòu)建cDNA文庫(kù)從而獲得目的基因．在獲得抗病基因后可通過(guò)RCR技術(shù)技術(shù)短時(shí)間大量擴(kuò)增，該技術(shù)需要Taq酶．
（3）培育抗BBTV香蕉的核心是構(gòu)建基因表達(dá)載體，構(gòu)建好的基因表達(dá)載體必須有標(biāo)記基因，標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞是否含有目的基因從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)．
（4）將抗BBTV基因?qū)�入香蕉植物�?xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（5）在抗BBTV香蕉培育過(guò)程中，用放射性同位素標(biāo)記的抗BBTV基因作探針進(jìn)行分子雜交檢測(cè)是否轉(zhuǎn)錄，用用香蕉束頂病毒（BBTV）侵染香蕉植株方法從個(gè)體水平鑒定香蕉植株的抗病性．

Answer 1

分析 1、PCR技術(shù)：
（1）概念：PCR全稱(chēng)為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)．
（2）原理：DNA復(fù)制．
（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物．
（4）過(guò)程：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)．
2、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
3、目的基因分子水平上的檢測(cè)：
①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)
②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)
③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．

解答 解：（1）由于三倍體植株體內(nèi)細(xì)胞減數(shù)分裂過(guò)程中發(fā)生聯(lián)會(huì)紊亂，不能形成正常生殖細(xì)胞，所以三倍體香蕉不結(jié)種子．
（2）為獲取抗BBTV基因，可從含有該抗病基因的細(xì)胞中提取對(duì)應(yīng)RNA，構(gòu)建cDNA文庫(kù)從而獲得目的基因．在獲得抗病基因后可通過(guò)RCR技術(shù)技術(shù)短時(shí)間大量擴(kuò)增，該技術(shù)需要Taq酶．
（3）培育抗BBTV香蕉的核心是構(gòu)建基因表達(dá)載體，構(gòu)建好的基因表達(dá)載體必須有標(biāo)記基因，標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞是否含有目的基因從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)．
（4）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法，將抗BBTV基因?qū)�入香蕉植物�?xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（5）在抗BBTV香蕉培育過(guò)程中，用放射性同位素標(biāo)記的抗BBTV基因作探針進(jìn)行分子雜交檢測(cè)是否轉(zhuǎn)錄，用用香蕉束頂病毒侵染香蕉植株方法從個(gè)體水平鑒定香蕉植株的抗病性．
故答案為：
（1）減數(shù)分裂過(guò)程中發(fā)生聯(lián)會(huì)紊亂，不能形成正常生殖細(xì)胞
（2）cDNA       RCR技術(shù)     Taq
（3）鑒別受體細(xì)胞是否含有目的基因從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)
（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（2分）
（5）抗BBTV基因（目的基因）    用香蕉束頂病毒（BBTV ）侵染香蕉植株

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)秘能力和判斷能力，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力，屬于考綱中識(shí)記、理解層次的要求．